[发明专利]基于生物材料3D人多能干细胞分化心肌组织的构建方法

权利要求书

1.基于生物材料3D人多能干细胞分化心肌组织的构建方法，其特征在于：按照如下步骤构建：

步骤1：取三份相同的人多能干细胞；

步骤2：采用mTeSR培养基分化扩增三份人多能干细胞；

步骤2：采用心机分化试剂盒将第一份人多能干细胞诱导分化，并采用乳酸筛选法进行纯化，得到心肌细胞；

步骤3：将第二份人多能干细胞诱导分化，并采用磁珠分选的方法进行纯化，得到血管平滑肌细胞；

步骤4：将第三份人多能干细胞诱导分化，同样采用磁珠分选的方法进行纯化，得到内皮细胞；

步骤5：将心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞利用3D打印机注入到生物材料X中，之后在培养基A中进行培养，完成3D人多能干细胞分化心肌组织的构建整合，得到3D人多能干细胞分化心肌组织。

2.根据权利要求1所述的基于生物材料3D人多能干细胞分化心肌组织的构建方法，其特征在于：步骤5所述的生物材料X是对健康动物心脏脱细胞后的细胞外基质进行组分分析，然后根据分析结果在体外进行合成、重构的三维生物材料。

3.根据权利要求1所述的基于生物材料3D人多能干细胞分化心肌组织的构建方法，其特征在于：步骤5所述的培养基A包括无机盐、氨基酸、微量矿物质、维生素、生长因子/蛋白质、能源基材、血脂和其他组分。

4.根据权利要求3所述的基于生物材料3D人多能干细胞分化心肌组织的构建方法，其特征在于：所述能源基材包括D-葡萄糖、丙酮酸钠；其他组分包括次黄嘌呤钠、酚红、腐胺二盐酸盐、胸苷、2-巯基乙醇、嵌段式聚醚F-68、失水山梨醇单油酸酯聚氧乙烯醚。