[发明专利]一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法

权利要求书

1.一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)混合一定量的磷脂酰胆碱源、大豆油和水，充分震荡或搅拌至形成均一的体系；所述磷脂酰胆碱源中的磷脂酰胆碱与大豆油的质量比为0.7：1～8，所述原料中水的质量分数为1％～40％；

(2)将步骤(1)形成的混合物加热至40℃～65℃，再加入一定量的磷脂酶，引发磷脂酰胆碱的水解反应；磷脂酰胆碱源中的磷脂酰胆碱与磷脂酶的质量比为3.5～7；

(3)充分反应后灭酶终止反应，萃取，分离纯化得到GPC。

2.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(1)所述磷脂酰胆碱源中的磷脂酰胆碱与大豆油的质量比为0.7：8，所述原料中，即磷脂酰胆碱源、大豆油和水中水的质量分数为2.9％～4.8％。

3.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(1)所述磷脂酰胆碱源为大豆浓缩磷脂。

4.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(1)所述充分震荡是指在40℃～65℃的恒温振荡器中以300r/min震荡至反应完全。

5.根据权利要求4所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，所述震荡时间为3～8小时。

6.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(2)所述磷脂酶为磷脂酶A1，步骤(3)所述充分反应时间不短于达到反应平衡状态所需时间。

7.根据权利要求6所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，所述充分反应时间为3～8小时。

8.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(3)在90℃下灭酶15min终止反应。

9.根据权利要求1所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤(3)灭酶终止反应后，向反应体系加入甲醇进行萃取，以3500r/min离心5min后取上层清液，得到含有GPC的反应产物，然后进行分离纯化，最后得到GPC。

10.根据权利要求9所述的一种利用磷脂酶制备甘油磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，所述分离纯化包括使用丙酮脱油，再减压蒸馏，接着使用柱层析进一步纯化，利用活性炭脱色，最后进行真空冷冻干燥得到GPC。