[发明专利]一种B7H4/1E10单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开一种B7H4/1E10单克隆抗体及其应用，该抗体的轻链可变区的3个互补决定区序列分别为：Lys Ser Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr；Leu Val Ser；Gln His Ile Arg Glu Leu Thr Arg；重链可变区的3个互补决定区序列分别为：Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly；Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr；Ala Arg Glu Arg Ala Arg Leu Leu Arg Ile Asn Ala Met Asp Tyr。该单克隆抗体效价可达1×10^‑6，亲和力高。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种高亲和力的B7H4/1E10单克隆抗体及其应用。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类健康的一类恶性疾病，在其发生发展过程中，T细胞活化和耐受的免疫调节具有至关重要作用。B7家族共刺激分子表达及功能失衡导致宿主免疫不应答在肿瘤免疫逃逸中发挥了重要且关键作用，因此B7家族共刺激因子已成为肿瘤免疫逃逸机制及肿瘤免疫治疗靶点研究的重点。人B7H4的 cDNA约1.8 kb，位于染色体1P 11.1，在基因组上跨越66 kb，含有6个外显子和5个内含子，第6个外显子存在两种可变剪切形式，由此产生两种不同的剪切本。B7H4的开放读码框由849个碱基对组成，编码由282个氨基酸组成的蛋白，其N端为一个信号肽、1个含数个N-糖基化位点的胞外区、1个大的跨膜疏水区和仅2个氨基酸组成的胞内区。

研究显示，B7H4不但在专职抗原呈递细胞中高表达，并广泛分布在非淋巴组织上，新鲜分离的T细胞、B细胞、单核细胞、树突状细胞表面无B7H4，但在体外经刺激后，B7H4能被诱导表达；恶性肿瘤细胞中，包括膀胱癌，卵巢癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、肺癌、乳腺癌、胃癌等，B7H4 mRNA表达水平高于正常组织，其蛋白表达水平同样上调，且被证实与肿瘤的发生、侵袭及迁移等密切相关。

因此，B7H4作为靶点，在恶性肿瘤的治疗、诊断以及预后判断中，均具有较为广阔的应用前景，为了更好地研究B7H4在恶性肿瘤中的信号转导通路，以及为恶性肿瘤的诊断、生物治疗奠定物质基础，本专利制备了具有良好特异性、高亲和力的鼠源性抗体。

中国专利（申请号99107586.2）中公开了一种可以高效广谱抑制肿瘤生长和转移的新型抗体，具体公开了该抗体的轻链可变区由112个氨基酸组成，包括Lys Ser Val SerThr Ser Gly Tyr Ser Tyr和Leu Val Ser。

发明内容

本发明提供一种高亲和力的B7H4/1E10单克隆抗体及其应用，包括该单克隆抗体的氨基酸和核苷酸序列，可以为构建高亲和力、良好特异性的抗B7H4嵌合或人源化基因工程抗体提供支持，也为以B7H4靶点的药物研发及应用奠定基础。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种高亲和力的B7H4/1E10单克隆抗体，包括轻链和重链可变区，所述轻链可变区的3个互补决定区（CDR）序列分别为：

CDR1：Lys Ser Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr；

CDR2：Leu Val Ser；

CDR3：Gln His Ile Arg Glu Leu Thr Arg；

所述重链可变区的3个互补决定区（CDR）序列分别为：

CDR1：Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly ；

CDR2：Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr；

CDR3：Ala Arg Glu Arg Ala Arg Leu Leu Arg Ile Asn Ala Met Asp Tyr。