[发明专利]一种栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法

权利要求书

1.一种栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.取中药栀子，粉碎过10～120目筛，利用超声辅助溶剂提取法进行提取，提取时间为1～2h，提取3～4次；所述的超声辅助溶剂提取法使用的溶剂为醇的质量分数为15～45％的水溶液，每次提取过程使用的醇溶液与中药栀子的质量比为3～10：1；合并提取液，过滤除去中药栀子渣，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压浓缩至无醇味，获得栀子粗提物；

b.向栀子粗提物中加入水稀释，使其比重达到1.03～1.22，加入分离膜，搅拌0.5～2h，过滤并用乙醇洗涤三次，滤液为栀子膜分离纯化提取物；所述的分离膜为壳聚糖-氧化石墨烯-羟基磷灰石多孔膜；

c.采用高效液相色谱法对栀子膜分离纯化提取物进行分离。

2.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述的醇溶液选自甲醇水溶液、乙醇水溶液、丙醇水溶液、异丙醇水溶液中的任一种。

3.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述的壳聚糖-氧化石墨烯-羟基磷灰石多孔膜中，壳聚糖、氧化石墨烯、羟基磷灰石的质量比为6：1～6：50。

4.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的固定相为硅胶。

5.如权利要求4所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的固定相为环糊精改性硅胶。

6.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述高效液相色谱的流动相包括水相和有机相，其中水相和有机相的体积比为100：5～20。

7.如权利要求6所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述的有机相为甲醇；所述的水相为0.1wt％三氟乙酸水溶液。

8.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述高效液相色谱所使用的检测条件为：柱温30℃；检测波长为238nm；进样量为5μL。

9.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，还包括以下步骤：

a.配置环烯醚萜苷类化合物标准溶液：精确称取环烯醚萜苷类化合物标准品，用甲醇水溶液溶解得到环烯醚萜苷类化合物的标准储备液；然后依次取各环烯醚萜苷类化合物的标准储备液将其混合均匀并用甲醇水溶液稀释定容得到混合标准溶液，所述的甲醇水溶液为体积比为1：1的甲醇和水混合溶液；

b.绘制标准工作曲线：取所述的标准储备液0.5、1、2、4、6、10μL，按所述的高效液相色谱条件进样测定，以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线；

c.测定：按所述的液相色谱条件进样测定，对所述的栀子膜分离纯化提取物进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，根据色谱峰的保留时间定性，根据色谱峰的峰面积进行外标法定量。

10.如权利要求1所述的栀子中环烯醚萜苷类化合物的分离鉴定方法，其特征在于，所述的环烯醚萜苷类化合物为山栀苷、羟异栀子苷。