[发明专利]一种四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体及其制备方法

权利要求书

1.一种四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体，其特征在于：包括磁性纳米内核、包覆在磁性纳米内核外的外壳1和外壳2，磁性纳米内核和外壳1紧密配合，外壳1和外壳2紧密配合；磁性纳米内核的材料为Fe₃O₄，外壳1的材料为羧甲基纤维素(分子式为[C₆H₇O₂(OH)₂CH₂COONa]_n)，外壳2的材料为聚乙烯亚胺(分子式为(CH₂CH₂NH)_n)。

2.根据权利要求1所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体，其特征在于：聚乙烯亚胺表面带有强正电荷(zeta电位>20mV)，而磁性Fe₃O₄内核带有强负电荷(zeta电位<-20mV)。

3.一种权利要求1或2所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于包括下述步骤：

(1)将可溶性的二价铁盐和三价铁盐、羧甲基纤维素加入反应容器，分散处理，加入试剂A进行反应，得到含有羧甲基纤维素外壳1的磁性Fe₃O₄；

(2)将含有羧甲基纤维素外壳1的磁性Fe₃O₄、聚乙烯亚胺(分子量为25kDa-750kDa)和环氧氯丙烷加入反应容器中，处理后搅拌反应，制得具有核壳结构的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体。

4.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，二价铁盐、三价铁盐和羧甲基纤维素的摩尔数比为1:(1.5～2.5):(1～2)，其中二价铁盐、三价铁盐按铁元素的摩尔数计，羧甲基纤维素按纤维二糖残基的摩尔数计。

5.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：二价铁盐为硫酸亚铁、硝酸亚铁、氯化亚铁；三价铁盐为硫酸铁、硝酸铁、氯化铁。

6.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)，所述分散处理是加入1-乙基-3-甲基咪唑甲基乙酸盐进行充分溶解分散；二价铁盐、三价铁盐和羧甲基纤维素的总摩尔数与1-乙基-3-甲基咪唑甲基乙酸盐的摩尔数之比为1:(5～100)。

7.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述试剂A是氨水和环氧氯丙烷。

8.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，反应的温度为60～90℃，反应的时间为1～3小时。

9.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，含有羧甲基纤维素外壳1的磁性Fe₃O₄、聚乙烯亚胺的质量比为1:(1～2)；聚乙烯亚胺和环氧氯丙烷的质量比为1:(1～2)。

10.根据权利要求3所述的四氧化三铁-羧甲基纤维素-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，搅拌反应的温度为30℃，时间为0.1～24小时。