[发明专利]杭椒辣椒素浓缩提取测定法在审
申请号: | 201711477870.8 | 申请日: | 2017-12-29 |
公开(公告)号: | CN108181397A | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 杨静;祝彪;龚翔宇;吕晓菡;陈建瑛 | 申请(专利权)人: | 浙江农林大学;杭州市农业科学研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/74 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 311300 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辣椒素 二氢辣椒素 高效液相色谱 紫外检测器 浓缩提取 测定法 浓缩液 色谱峰 鲜辣椒 冷冻干燥技术 四氢呋喃溶液 真空冷冻干燥 长期保存 待测样品 分析条件 活性物质 损失减少 新鲜辣椒 标准品 上清液 分析 甲醇 磨粉 去除 浓缩 保留 | ||
1.杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是包括如下步骤:
1)、干燥:
以新鲜辣椒作为待测样品,将待测样品用液氮处理15~30秒后放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥,直至含水率≤0.5%;
2)、磨粉:
将步骤1)冷冻干燥后辣椒粉碎至过50目筛;
3)、提取:
按照1g/2~10ml的料液比,在步骤2)所得的辣椒冻干粉末中加入甲醇-四氢呋喃溶液,用超声波仪提取5~30分钟后离心;分别得上清液和沉淀;
所述甲醇-四氢呋喃溶液由甲醇、四氢呋喃按照1:1的体积比混合而得;
4)、浓缩:
于60±0.5℃恒温水浴中,将步骤3)所得的上清液浓缩至原体积五分之一,得浓缩液;
5)、将辣椒素和二氢辣椒素的标准品用高效液相色谱-紫外检测器进行分析,从而获得辣椒素的浓度与色谱峰面积的对应关系以及二氢辣椒素的浓度与色谱峰面积的对应关系;
6)、将步骤4)所得的浓缩液用高效液相色谱-紫外检测器进行分析,分析条件同步骤5);从而获得待测样品中辣椒素和二氢辣椒素的色谱峰面积;
将上述色谱峰面积导入步骤5)所得的对应关系中,从而获得待测样品中辣椒素和二氢辣椒素的浓度。
2.根据权利要求1所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
所述步骤5)和步骤6)中的高效液相色谱-紫外检测器分析条件均为:
色谱柱:Hypersil ODS2 250×4.0mm,5μm;
流动相:80%甲醇;
流速:0.8ml/min;
紫外波长:280nm;
柱温:30℃;
进样量:10μl。
3.根据权利要求2所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
所述步骤3)所得的沉淀替代辣椒冻干粉末,重复进行步骤3)所述的提取2~4次;
将所有的提取液合并后进行后续的步骤)。
4.根据权利要求2或3所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
真空冷冻干燥机的真空度为0.57~0.62mpa;冷冻温度为-60~-55℃,冷冻干燥时间为≥72小时。
5.根据权利要求2或3所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
步骤2)所得的辣椒冻干粉于-20℃保存。
6.根据权利要求2或3所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
所述步骤4)中,上清液浓缩后过0.45μm滤膜,得浓缩液。
7.根据权利要求2或3所述的杭椒辣椒素浓缩提取测定法,其特征是:
所述步骤3)的提取中,在30~40分钟内分三次在步骤2)所得的辣椒冻干粉末中加入甲醇-四氢呋喃溶液。
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