[发明专利]一种免疫细胞培养基、培养方法以及用途有效
申请号: | 201711478873.3 | 申请日: | 2017-12-29 |
公开(公告)号: | CN108251369B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 马旭;高建恩;郭昌龙 | 申请(专利权)人: | 国家卫生计生委科学技术研究所 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N5/0784 |
代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 李静 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫 细胞 培养基 培养 方法 以及 用途 | ||
1.一种培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,
包括如下步骤:
S1、采集待培养的免疫细胞并激活;使用细胞培养刺激液激活所述免疫细胞,所述细胞培养刺激液包括基础细胞培养基和细胞因子;所述细胞因子中包括白介素2、白介素15和白介素21;所述待培养的免疫细胞为外周血或脐带血单个核细胞;
S2、将激活的所述免疫细胞接种至免疫细胞培养基中进行细胞培养;所述免疫细胞培养基包括基础细胞培养基、细胞因子和糖皮质激素;所述细胞因子为白介素2;所述免疫细胞培养基中还包括维生素B3;所述维生素B3的含量为2-6μg/mL;
S3、收获所述CD8+CD56+CD3-的NK细胞;
所述免疫细胞培养基中所述糖皮质激素的含量为0.6-1.2μg/mL。
2.根据权利要求1所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素选自甲氢泼尼松琥珀酸钠、可的松、氢化可的松、强的松、强的松龙、甲基强的松龙、去炎松、地塞米松和倍他米松中的至少一种。
3.根据权利要求1所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素为甲氢泼尼松琥珀酸钠。
4.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素的浓度为0.8μg/mL。
5.根据权利要求1或2所述的培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述免疫细胞培养基中所述细胞因子的含量为50-4000U/mL。
6.根据权利要求5所述的培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述细胞因子含量为1000U/mL。
7.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述维生素的含量为4μg/mL。
8.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,细胞培养刺激液中所述白介素2含量为50U/mL-4000U/mL,所述白介素15含量为5ng/mL-100ng/mL,所述白介素21含量为1ng/mL-50ng/mL。
9.根据权利要8所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述白介素2的浓度为500U/mL,所述白介素15浓度为20ng/mL,所述白介素21浓度为5ng/mL。
10.权利要求1-9任一项所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法在培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞中的用途。
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