[发明专利]一种免疫细胞培养基、培养方法以及用途有效

专利信息
申请号: 201711478873.3 申请日: 2017-12-29
公开(公告)号: CN108251369B 公开(公告)日: 2021-03-23
发明(设计)人: 马旭;高建恩;郭昌龙 申请(专利权)人: 国家卫生计生委科学技术研究所
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783;C12N5/0784
代理公司: 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 代理人: 李静
地址: 100081 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 免疫 细胞 培养基 培养 方法 以及 用途
【权利要求书】:

1.一种培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,

包括如下步骤:

S1、采集待培养的免疫细胞并激活;使用细胞培养刺激液激活所述免疫细胞,所述细胞培养刺激液包括基础细胞培养基和细胞因子;所述细胞因子中包括白介素2、白介素15和白介素21;所述待培养的免疫细胞为外周血或脐带血单个核细胞;

S2、将激活的所述免疫细胞接种至免疫细胞培养基中进行细胞培养;所述免疫细胞培养基包括基础细胞培养基、细胞因子和糖皮质激素;所述细胞因子为白介素2;所述免疫细胞培养基中还包括维生素B3;所述维生素B3的含量为2-6μg/mL;

S3、收获所述CD8+CD56+CD3-的NK细胞;

所述免疫细胞培养基中所述糖皮质激素的含量为0.6-1.2μg/mL。

2.根据权利要求1所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素选自甲氢泼尼松琥珀酸钠、可的松、氢化可的松、强的松、强的松龙、甲基强的松龙、去炎松、地塞米松和倍他米松中的至少一种。

3.根据权利要求1所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素为甲氢泼尼松琥珀酸钠。

4.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述糖皮质激素的浓度为0.8μg/mL。

5.根据权利要求1或2所述的培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述免疫细胞培养基中所述细胞因子的含量为50-4000U/mL。

6.根据权利要求5所述的培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述细胞因子含量为1000U/mL。

7.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述维生素的含量为4μg/mL。

8.根据权利要求1或2所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,细胞培养刺激液中所述白介素2含量为50U/mL-4000U/mL,所述白介素15含量为5ng/mL-100ng/mL,所述白介素21含量为1ng/mL-50ng/mL。

9.根据权利要8所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法,其特征在于,所述白介素2的浓度为500U/mL,所述白介素15浓度为20ng/mL,所述白介素21浓度为5ng/mL。

10.权利要求1-9任一项所述培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞的方法在培养CD8+CD56+CD3-的NK细胞中的用途。

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