[发明专利]基因的应用及动物模型的构建方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别涉及基因的应用及动物模型的构建方法。本发明公开了Oxtr基因可以作为治疗乳腺癌的靶基因，催产素受体OXTR过表达提供转基因小鼠乳腺癌诱导模型，可以用于乳腺癌致病机理研究，也可以用于药物筛选和药效测试。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及基因的应用及动物模型的构建方法。

背景技术

乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤，威胁着全球女性的生命健康。每年全世界有超过167万女性患乳腺癌，而其中有52.9％发生在发展中国家。实验动物模型可以复制某些人类疾病，为医学研究的重要手段之一。乳腺癌实验动物模型在乳腺癌发病机理研究、药物有效性评估等方面起着非常关键的作用，具有广阔的前景。

乳腺癌动物模型最常使用的动物包括鼠类动物、犬、猫等，均能产生自发性乳腺癌，其中移植型模型最常使用的动物则是裸鼠(Nude Mice)。Grist在1962年从非近交系小鼠中发现。由于裸鼠无胸腺，缺乏成熟的T淋巴细胞，肿瘤移植后生长良好，并能保持肿瘤细胞的原有形态及病理特性，是肿瘤研究中较为理想和常用的动物实验工具之一。乳腺癌裸鼠动物模型的建立的方法较多，从最初的自发性、诱发性模型发展到移植型、转基因型、基因敲除模型等。

G蛋白偶联受体参与重要的生物学功能，目前新上市的药物有40％是针对G蛋白偶联受体的，可以说G蛋白偶联受体是新药物研发的摇篮。人类的催产素受体OXTR属于G蛋白偶联受体家族的成员，由389个氨基酸组成，其蛋白为含有7个跨膜结构域的多肽。基因定位于染色体的3p25.3，跨度约为19kbp，含有3个内含子和4个外显子和7个跨膜结构域。第二个跨膜结构域与受体本身的活化有关，第三和第六个跨膜结构域是G蛋白的结合位点。

当催产素刺激时，催产素受体与G-蛋白相偶联，激活磷脂酶C，通过细胞内的磷酸肌醇信号系统，诱导细胞质内Ca²⁺浓度升高，导致子宫在分娩时的强烈收缩。催产素受体广泛分布于杏仁核、海马、纹状体、前扣带皮层、脑干、伏隔核、膝下皮层等脑区，其上有很多不同的结合位点，对催产素有很强的亲和力。除了脑神经组织高表达外，在小鼠体内，OXTR主要表达在子宫基层、乳腺导管肌上皮细胞中、肾小管中，在脑的前嗅觉区域、海马的CA2和CA3区域、屏状核、皮质杏仁核、下丘脑弓状核以及整个脑的皮质区域都有表达。但是，催产素受体在乳腺表达的研究未见报道。

因此，提供催产素受体在乳腺表达中的应用以及构建小鼠乳腺癌模型对治疗乳腺癌具有重要的现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种基因的应用及动物模型的构建方法。本发明公开了Oxtr基因可以作为治疗乳腺癌的靶基因，催产素受体OXTR过表达提供转基因小鼠乳腺癌诱导模型，可以用于乳腺癌致病机理研究，也可以用于药物筛选和药效测试。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了oxtr基因作为预防和/或治疗乳腺癌的药物靶点的应用。

本发明还提供了oxtr基因的过表达在构建乳腺癌动物模型中的应用。

本发明还提供了oxtr基因的过表达在药物筛选或药效测试中的应用。

本发明还提供了oxtr基因的表达抑制剂在制备预防和/或治疗乳腺癌的药物中的应用。

本发明还提供了一种表达载体，含有编码oxtr基因的核苷酸序列。

在本发明的一些具体实施方案中，提供的表达载体还含有β-Actin启动子和/或β-Globin内含子。