[发明专利]一种慢病毒及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201711481042.1 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN107936122A | 公开（公告）日： | 2018-04-20 |
| 发明（设计）人： | 韦丹;付苏雷;连杰;李德志;赵礼军;吴雷振 | 申请（专利权）人： | 河南省华隆生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N7/01;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 453000 河南省新*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种慢病毒胞膜糖蛋白，其特征在于，所述慢病毒胞膜糖蛋白在元件G上游修饰有元件S；
其中，所述元件S为特异性识别NK细胞膜表面蛋白的辅助蛋白元件，所述元件G为衍生自野生型慢病毒包膜糖蛋白的蛋白元件。
2.根据权利要求1所述的慢病毒胞膜糖蛋白，其特征在于，所述元件S和元件G通过元件L相连，所述元件L为连接肽；
优选地，所述元件S为抗CD56单链抗体；
优选地，所述元件S带组氨酸标签；
优选地，所述元件S的核酸序列如SEQ ID NO.1所示；
优选地，所述元件L为柔性肽；
优选地，所述柔性肽的核酸序列如SEQ ID NO.2所示；
优选地，所述元件G为VSV-G、RD114、BaEv或MLV中的任意一种或至少两种的组合。
3.一种编码如权利要求1或2所述的慢病毒胞膜糖蛋白的核酸序列。
4.一种载体，其特征在于，所述载体包括如权利要求3所述的核酸序列；
优选地，所述载体为pMD2.G；
优选地，所述载体的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.一种慢病毒，其特征在于，所述慢病毒导入有如权利要求4所述的载体，表达如权利要求1或2所述的慢病毒胞膜糖蛋白。
6.一种制备如权利要求5所述的慢病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建如权利要求4所述的载体；
(2)将步骤(1)所述的载体和包装质粒共转染哺乳细胞，进行病毒包装。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述构建的方法为将如权利要求3所述的核酸序列插入pMD2.G的HindIII和AdeI酶切位点之间，构建得到所述载体；
优选地，步骤(2)所述哺乳细胞为293T细胞。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将如权利要求3所述的核酸序列插入pMD2.G的HindIII和AdeI酶切位点之间，构建得到所述载体；
(2)将步骤(1)所述的载体和包装质粒共转染293T细胞，进行病毒包装。
9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括如权利要求1或2所述的慢病毒胞膜糖蛋白、如权利要求3所述的核酸序列、如权利要求4所述的载体或如权利要求5所述的慢病毒中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂中的任意一种或至少两种的组合。
10.一种如权利要求9所述的药物组合物用于制备T细胞免疫疗法治疗肿瘤的药物。
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