[发明专利]一种利用氨基酸发酵尾液制备生物刺激素的方法

权利要求书

1.一种利用氨基酸发酵尾液制备生物刺激素的方法，其包括如下步骤：步骤1）分离、烘干以及粉碎，步骤 2）浓缩，步骤3）微生物酶解处理，步骤4）制备海藻提取物，步骤5）制备生物刺激素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1）分离、烘干以及粉碎：将氨基酸发酵尾液通过碟片分离机进行分离，收集菌体蛋白沉淀和废弃母液，再将菌体蛋白沉淀烘干，然后粉碎成菌体蛋白粉末；

步骤 2）浓缩：将步骤1）所得废弃母液浓缩至原体积的1/5，得到浓缩液；

步骤3）微生物酶解处理：将黑曲霉ATCC 16404接种到种子罐培养基中进行培养，温度控制在30℃，培养至菌浓度为1.0×10⁸cfu/ml，得到种子液；将步骤1）所得菌体蛋白粉末添加到10倍重量的种子液中，调整pH为3.5，温度为30℃，100rpm搅拌42h，然后添加电气石粉，同时调整温度为41℃，继续以100rpm搅拌培养6h，得到酶解液；

步骤4）制备海藻提取物：将海藻晾干，粉碎成粉末，然后添加到两倍重量的6wt%的碳酸氢钠溶液中，浸泡30-50min，再升温至50℃，保温条件下，超声处理，然后降至室温，过滤，收集滤液，浓缩成原体积的1/3，即得海藻提取物；

步骤5）制备生物刺激素：将步骤2）所得浓缩液、步骤3）所得酶解液、腐植酸以及步骤4）所得海藻提取物按添加到搅拌罐中，采用氢氧化钾调节pH为7，然后100rpm搅拌30min，最后置于4℃保存，即得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述种子罐培养基的成分为：20g/L葡萄糖，6g/L玉米浆，2g/L蛋白胨，0.2g/L磷酸二氢钾，0.2g/L磷酸氢二钾，0.1g/L硫酸镁，0.1g/L硫酸锰，溶剂为水。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述电气石粉的添加量占菌体蛋白粉末的2wt%。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述超声时间为10-15min，超声频率为20KHz。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2）所得浓缩液、步骤3）所得酶解液、腐植酸以及步骤4）所得海藻提取物的质量比为30-50:20-30:10-15:7-9。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述碟片分离机的转速为5000rpm，离心时间为3min。