[发明专利]一种他卡西醇的异构体杂质PY3及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种制备他卡西醇的异构体杂质PY3，即(1β,3β-5Z,7E)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19)-三烯-1,3,24-三醇的方法，其结构如式1化合物所示，

，

其特征在于：首先，由式2化合物制备得到式6化合物，包含如下步骤：

（a）将式2化合物即维生素D2 18.97g，在-10℃的低温下，缓慢通入二氧化硫气体，使之溶解于液态的二氧化硫中，TLC监控反应完全，减压抽去二氧化硫气体，得到油状物式3化合物，24.30g；

（b）将上述式3化合物在氮气保护下，加入7.81g咪唑，132mL二氯甲烷，然后加入叔丁基二甲基氯硅烷8.65g，80min后再补加叔丁基二甲基氯硅烷1.44g，TLC监控反应完全，脱除溶剂，剩余物用乙酸乙酯200mL溶解，依次用水100mL，饱和食盐水100mL洗涤，无水硫酸镁干燥，滤液浓缩至干，得到式4化合物，27.91g；

（c）将上述式4化合物中加入250mL 95%乙醇，碳酸氢钠2.5g，加热回流140min后补加碳酸氢钠5g，加毕继续反应2h，脱除溶剂，加入乙酸乙酯，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，滤液浓缩至干，得到式5化合物，21.01g；

（d）将上述式5化合物溶于210mL二氯甲烷中，加入N—甲基氧化吗啉19.3g，加热至42℃左右使之澄清，再加入二氧化硒3.19g溶于甲醇210mL中的溶液，继续反应2h，脱除溶剂，剩余物溶于乙酸乙酯300mL，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，滤液浓缩得到式6化合物的粗品，然后经过柱层析或者制备液相的分离纯化，得到式6化合物精品15g；

然后，再由式6化合物制备得到式1化合物，包含如下步骤：

（1）将对硝基苯甲酸10g、三苯基膦20g、四氢呋喃400mL和式6化合物15g加入反应瓶，搅拌溶解，冰盐浴降温，并在低温下滴加偶氮二甲酸二乙酯12g溶于50mL四氢呋喃的溶液，滴完0℃反应，TLC监控反应完全，浓缩，残余物用乙酸乙酯溶解，饱和食盐水洗涤两次，分液，有机相减压浓缩；向浓缩后的残余物中加入甲醇400mL和碳酸钾固体10g，30℃搅拌反应，TLC监控反应完全，减压浓缩，残余物加入乙酸乙酯500mL和水500mL溶解，分液，有机相水洗两次，无水硫酸钠干燥，浓缩干得黑色油状物；柱层析硅胶纯化，洗脱剂为正己烷：乙酸乙酯=30:1，减压浓缩干，所得油状物中加入二氯甲烷、咪唑，搅拌溶解后，控温0-5℃, 滴加叔丁基二甲基氯硅烷；滴加完毕后升至室温反应2h，TLC监控至原料反应完全，水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，得深棕色油状物，即式7化合物8.4g；

（2）将式7化合物8.4g溶于二氯甲烷150mL中，降温，-20~-10℃向反应液中通入二氧化硫气体，通毕，升温至-15~-10℃下控温搅拌反应1 h，TLC监测反应完全，脱除溶剂得黄色油状物9.0g，即式8化合物；

（3）将式8化合物9.0g溶于等体积的二氯甲烷和四氢呋喃混合溶剂120mL中，降温至-65~-80℃后通入臭氧，搅拌反应6~8 h，TLC监测反应完全后加入三苯基膦10g，室温搅拌0.5h，将反应液依次用5%碳酸氢钠溶液、水、饱和盐水各洗涤一次，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干得到黄色固体，即式9化合物；

（4）将式9化合物溶于70mL95%乙醇，加入碳酸氢钠8.6g，搅拌升温至75～85℃下反应1~2 h，TLC监测反应完全，加入乙酸乙酯和纯化水溶解分液，有机相依次用水、饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠，滤液浓缩至干得到棕红色固体11g，即式10化合物；

（5）将式10化合物11g与3-甲基-1-(三苯基亚甲基膦)- 2-丁酮14g，加入到甲苯100mL中，110~115℃下回流反应30 ~35 h，TLC监测反应完全，冷至室温，浓缩至干后柱层析纯化，得到浅黄色油状物2.1g，即式11化合物；

（6）将式11化合物2.1g、碳酸氢钠5g、连二硫酸钠6g、十六烷基三甲基氯化铵0.7g，加入到80mL甲苯和80mL纯化水中，加热至60~65℃下，反应1~1.5 h，TLC监测反应完全，冷至室温，后加入乙酸乙酯和纯化水分液，有机层依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干得到浅黄色油状物，式12化合物；

（7）将式12化合物溶于四氢呋喃20mL中，加入(1S,2R)-(-)-1-氨基-2-茚醇1g，氮气保护下，降温至0℃以下，滴加三仲丁基硼氢化钾的四氢呋喃溶液10mL，滴毕，在-5~0℃搅拌1h， TLC监测反应完全后加入冰水淬灭，后加入乙酸乙酯300mL和纯化水300mL分液，有机相用饱和盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干柱层析纯化，得到浅黄色油状物1g，即式13化合物；

（8）将式13化合物、9-乙酰基蒽0.05g、吡啶0.1mL和甲苯70mL，加入到光化学反应器中，在氮气保护下进行光照反应，TLC监测反应完全，脱除溶剂，得到浅黄色油状物1g，即式14化合物；

（9）将式14化合物溶于四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液100mL中，50-55℃反应2h，TLC监测反应完全，脱除溶剂，剩余物中加入乙酸乙酯300mL和水300mL分液，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩至干，剩余物中加入马来酸酐0.1g和乙酸乙酯50mL，30-35℃下搅拌反应24h，浓缩至干后柱层析得到白色固体300mg，即式1化合物，HPLC纯度：99.5%。