[发明专利]咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法

说明书

中药特征图谱是一种较全面的反映中药材或复方制剂所包含的化学信息的分析方法，本发明公开了咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法，基于高效液相色谱法构建了咽喉清口含片的特征图谱，用于咽喉清口含片的质量控制，主要用于鉴别和评价该制剂以及半成品的真伪、质量均一性及稳定性，本发明得到的咽喉清口含片的特征图谱，能够综合有效地监控咽喉清口含片的质量，具有表征全面，重复性好，稳定性佳的特点。

技术领域

本发明涉及中药领域，尤其是涉及一种咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法。

背景技术

长时间以来，对于中药材、饮片及中药制剂的质量控制，主要以单成分作为指标进行考察跟踪，然而对于中药而言，其物质基础较为复杂，其药效的发挥，亦是基于这种复杂体系的组分群而实现，采用单一成分为指标进行质量控制，未能完全体现其复杂组成的物质基础，未能体现中药的综合性和整体性，容易失之偏颇。

中药色谱特征图谱是一种综合的、可量化的鉴定中药材及中药制剂的手段，其采用色谱分离技术，可较全面的表征中药中的化学成分，从而将质量控制指标从单一成分提高为综合性的组分群，更能体现中药的性质。中药色谱特征图谱主要用于鉴别药品真伪,以及评价原药材、半成品及制剂质量的均一性和稳定性。随着人们对药品质量要求的不断提高，中药色谱特征图谱得到越来越多应用。

咽喉清口含片为深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院院内制剂，并已获得国家中药六类新药临床研究批件。该制剂由金银花、玄参、青果、胖大海、诃子、罗汉果、桔梗、射干、山豆根、金果榄、锦灯笼、川贝母、薄荷脑、薄荷油和冰片组成，具有清热解毒、化痰利咽的功能，临床上用于治疗外感风热型急性咽炎。咽喉清口含片组方药味较多，药效物质基础复杂，目前咽喉清口含片的质量控制方法和质量控制标准有待于进一步完善。

发明内容

为解决现有技术存在问题，本发明的目的是提供一种咽喉清口含片的特征图谱及其构建方法。

本发明的另一个目的是提供上述咽喉清口含片的特征图谱咽喉清口含片质量检测中的应用以及质量检测方法。

本发明所采取的技术方案是：

本发明提供一种咽喉清口含片的特征图谱的构建方法，包含以下步骤：

(1)制备供试品溶液：取咽喉清口含片研碎，加入20～50体积份的甲醇得到每1mL含0.04～0.1g所述咽喉清口含片的溶液，提取后过滤取滤液蒸干，加入20体积份的水，后加入10～30体积份的乙酸乙酯进行萃取，取乙酸乙酯层蒸干，加入甲醇稀释至5～10体积份，过滤后取滤液作为供试品溶液；

制备对照品溶液：称取绿原酸，加入甲醇制得绿原酸对照品溶液；

(2)分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，记录0-35min的色谱图，将10批次润喉清含片的HPLC色谱图导入国家药典委员颁布的“中药色谱指纹图相似度评价系统(2012版)”，选取“时间窗”宽度为0.1min，经过多点矫正和数据匹配生成色谱特征图谱共有模式，并以色谱图中绿原酸为参照峰，计算各色谱峰相对保留时间；

所述色谱分析的色谱条件是：色谱分离柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为水-乙腈洗脱液；采用梯度洗脱方式：0～5min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％，5～28min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％～57％，28～28.01min的洗脱液中乙腈体积百分含量为57％～13％，28.01～35min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％；检测波长为全波长扫描，2D通道选择260nm，柱温25～30℃，流速1.0mL，进样量10μL。

本发明还提供一种咽喉清口含片的特征图谱，采用上述的构建方法获得，所述特征谱图具有20个特征峰，以5号峰所代表的绿原酸为参照峰，各个特征峰相对保留时间和相对标准偏差为：