[发明专利]一种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的方法

权利要求书

1.一种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的方法，包括以下步骤：

(1)从自然发病的爆发性小肠球虫的鸡群中选取发病2天的病鸡10只。

(2)把10只鸡分别放血致死，切除头颈部及腿部，剥离鸡体表皮及羽毛，用酒精喷灯快速灼烧胴体表面，把灼烧后的胴体分为2组，每组5只，分别放置到两个无任何球虫卵囊的洁净操作台上。

(3)用灭菌的器械剖开其中一组鸡的腹腔，无菌操作取出十二指肠和小肠，把肠道及肠内容物加水后匀浆，匀浆液过100-200目滤网，滤液用离心机2000r/min离心5-15min，弃上清留沉淀，用100ml 2.5％的重铬酸钾溶液冲洗沉淀，把沉淀悬液倒入250ml锥形瓶中，放进恒温震荡培养箱中28℃、100r/min培养48h。得到卵囊A。

(4)采用步骤(3)中的方法处理另一组鸡的盲肠，得到卵囊B。

(5)取1日龄无球虫感染的鸡2只，分别在3-28日龄分6次接种卵囊A。40日龄时把2只鸡转移至另一个灭菌的隔离器中，并接种卵囊B 1000个/只。47日龄时按步骤(2)和(3)的方法处理鸡的盲肠，得到卵囊C。

(6)取7日龄无球虫感染的鸡10只，卵囊C适量，用玻璃纸法单卵囊分离技术分别对每只鸡接种，并分别单独隔离饲养，7天后用饱和盐水漂浮法检查每只鸡的粪便，按步骤(2)和(3)的方法处理卵囊阳性鸡的盲肠，得到卵囊D1、D2、D3……

(7)分别对卵囊D1、D2、D3……进行毒害艾美尔球虫虫种鉴定，留下符合条件的卵囊，即得到一株或数株纯化的毒害艾美尔球虫虫种。

2.如权利要求1所述的种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的方法，其特征在于，步骤(5)所述的分6次接种卵囊A：3-28日龄，每次间隔5天，依次接种2000个/只、5000个/只、10000个/只、5000个/只、2000个/只、1000个/只。