[发明专利]一种防治根结线虫的微生物菌肥及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物肥料与微生物农药技术领域，具体是涉及一种防治根结线虫的微生物菌肥及其制备方法。

背景技术

根结线虫是严重危害植物的土传病害之一，其侵染根系后形成大量的根结，而且植株表现生长矮小和叶片黄化等现象，导致植物对水分和养分的吸收困难，严重影响植物的正常生长和发育。因此，根结线虫对作物造成了巨大产量和经济的损失。作物连作是引起植物根结线虫病害发生的主要因素，但由于根结线虫寄主范围很广泛，其中包括绝大多数作物和杂草，一旦发生就很难通过轮作等其他途径防治。目前，在农业生产中防治根结线虫的方法主要是化学防治，但是对环境和人类自身造成了许多负面的影响，而且许多国家或地区已经对防治根结线虫的化学药品进入市场进行了严格限制。因此，寻找新的、环境友好型的生物防治方法是非常迫切和必要的。

海芋[ Alocasia macrorrhiza(L.)Schott]为天南星科海芋属植物，据《土农药及生物防治》记载，海芋水提取物对防治稻苞虫、粘虫、稻飞虱、稻叶蝉效果良好。侯学文等从海芋块茎中分离出海芋凝集素(Alocasia macrorrhiza lectin，AML)，并发现海芋凝集素对肺腺癌细胞株P18具有较强的直接杀伤能力。同时大量资料证明，来源于植物的多种凝集素(GNA、WGA、ConA等)均表现出明显的杀虫活性，并已在抗虫转基因植物中应用。但没有报道将海芋凝集素应用到防治根结线虫上。也没有将海芋叶应用到防治根结线虫上。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治根结线虫的微生物菌肥，防治根结线虫的微生物菌肥的原料主要为：湿海芋叶粉，甘蔗渣，磷酸氢钙，硫酸镁，卡伍尔链霉菌等组成；本发明生产的防治根结线虫的微生物菌肥，有效结合了植物防治虫与微生物代谢产物防治根结线虫的功能，能明显改善土壤环境质量，提高作物产量，具有生产成本低，环境友好，能耗低的特点，产品同时高效利用了利用率很低的具有明显辛辣味的海芋叶粉，对当地的经济与环保具有重要意义。

为了达到上述目的，本发明利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉800-900份，甘蔗渣50-100份，磷酸氢钙1-2份，硫酸镁0.1-0.2份，卡伍尔链霉菌10-20份等组成。

本发明的另一目的是提供一种防治根结线虫的微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：

⑴、向旋转蒸煮罐中依次加入800-900份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入甘蔗渣50-100份，磷酸氢钙1-2份，硫酸镁0.1-0.2份，搅拌均匀，121℃灭菌30-50min，降温至30℃；

⑵、向步骤⑴中灭菌的已经降温的发酵物料加入10-20份卡伍尔链霉菌种子，搅拌均匀，将均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为5-8cm，在湿度为55%-75%，温度为28-32℃的发酵室中发酵72-96h，待发酵物料布满白色菌体，检测其卡伍尔链霉孢子含量超过100亿CFU/g，即可以结束发酵；

⑶、将发酵物低温干燥至含水量小于13%，即可粉碎包装；

其中，卡伍尔链霉菌种子的制备方法如下：

取出菌种保藏管卡伍尔链霉菌ACCC 41145(购买于中国农业微生物菌种保藏中心)，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养4-5天。在平板下挑取单个菌落接种至茄子瓶中高氏一号固体培养基上，涂满整个茄子瓶，在培养箱中30℃培养4-6天，等菌体表面有浅粉红色孢子即可，将1L无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下，将洗下的卡伍尔链霉菌种子接种于装有350L 卡伍尔链霉菌液体培养基的 500L 种子发酵罐，初始 pH值为 7.2，温度为 30℃，通风 1:1，开搅拌，转速为200r/min；培养36-48小时，待菌体变粘稠，有大量菌丝产生，即可作为卡伍尔链霉菌种子；

其中，所述高氏一号培养基：淀粉 20g、NaCl 0.5g、KNO3 1g、KH2PO4·3H2O 0.5g、FeSO4·7H2O0.01g、MgSO4·7H2O 0.5g、琼脂 18g、水 1000ml；

其中，所述卡伍尔链霉菌液体培养基：葡萄糖20 g/L，豆粕粉20 g/L，硫酸镁0.5 g/L，碳酸钙2 g/L，pH7.2；各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。