[发明专利]一种猪肠道损伤的检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种猪肠道损伤的检测试剂盒，其特征在于，所述猪肠道损伤的检测试剂盒包括猪二胺氧化酶与瓜氨酸抗体包被的微孔板、HRP标记的猪二胺氧化酶与瓜氨酸抗体、TMB底物溶液、猪肠道损伤阳性标准血浆和阴性标准血浆。

2.一种猪肠道损伤的检测方法，所述检测试剂盒包括权利要求1所述的猪肠道损伤的检测试剂盒，其特征在于，包括如下步骤：

从待测仔猪的前腔静脉采血并分离血清，将所述血清作为待测样品；

将所述检测试剂盒加入所述待测样品中，测定所述待测样品中的猪二胺氧化酶以及瓜氨酸；

根据所述待测样品中的猪二胺氧化酶以及瓜氨酸的检测结果，判定猪肠道是否损伤。

3.如权利要求2所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述将所述检测试剂盒加入所述待测样品中，测定所述待测样品中的猪二胺氧化酶以及瓜氨酸的步骤，具体包括：

将待测样品分成两份；

将检测试剂盒加入第一份所述待测样品中，测定所述待测样品中的猪二胺氧化酶；

将检测试剂盒加入第二份所述待测样品中，测定所述待测样品中的瓜氨酸。

4.如权利要求3所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述将检测试剂盒加入第一份所述待测样品中，测定所述待测样品中的猪二胺氧化酶，具体包括如下步骤：

在微孔板上设置有空白孔、待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔，在待测样品孔依次加入待测样品，在阴性对照孔加入所述猪肠道损伤阴性标准血浆，在阳性对照孔加入所述猪肠道损伤阳性标准血浆，在每孔中均加入HRP标记的猪二胺氧化酶抗体；

将所述微孔板用封板膜封板后温育；

拆掉封板膜，将所述微孔板内的液体排出，洗涤，拍干；

在所述空白孔、待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔中均加入所述TMB底物溶液、显色剂A以及显色剂B进行显色；

在每孔中加入终止液终止反应；

测定各孔的吸光度OD值；

根据各孔的吸光度OD值，判断猪二胺氧化酶的特性。

5.如权利要求4所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述根据各孔的吸光度OD值，判断猪二胺氧化酶的特性的步骤，具体包括：

将待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔的OD值均减去空白孔的OD值，得到待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔对应的值分别为S、N以及P；

当S≥P，且S/N≥2.1时，判定猪二胺氧化酶为阳性，其他结果为阴性。

6.如权利要求4所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述测定各孔的吸光度OD值的步骤，具体包括：

在加所述终止液后15min内，用酶标仪在450nm波长测量各孔的吸光度OD值。

7.如权利要求3所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述将检测试剂盒加入第二份所述待测样品中，测定所述待测样品中的瓜氨酸的步骤，具体包括如下步骤：

在微孔板上设置有空白孔、待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔，在待测样品孔依次加入待测样品，在阴性对照孔加入所述猪肠道损伤阴性标准血浆，在阳性对照孔加入所述猪肠道损伤阳性标准血浆，在每孔中均加入HRP标记的瓜氨酸抗体；

将所述微孔板用封板膜封板后温育；

拆掉封板膜，将所述微孔板内的液体排出，洗涤，拍干；

在所述空白孔、待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔中均加入所述TMB底物溶液、显色剂A以及显色剂B进行显色；

在每孔中加入终止液终止反应；

测定各孔的吸光度OD值；

根据各孔的吸光度OD值，判断瓜氨酸的特性。

8.如权利要求7所述的猪肠道损伤的检测方法，其特征在于，所述根据各孔的吸光度OD值，判断瓜氨酸的特性的步骤，具体包括：

将待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔的OD值均减去空白孔的OD值，得到待测样品孔、阴性对照孔以及阳性对照孔对应的值分别为S、N以及P；

当S≥P，且S/N≥2.1时，判定瓜氨酸为阳性，其他结果为阴性。