[发明专利]MICS1心脏特异表达转基因动物的制备方法及应用

说明书

本发明公开了MICS1心脏特异表达转基因动物的制备方法及应用，该方法包括将携带有MICS1基因的转基因载体引入受精卵或胚胎干细胞，将注射后的受精卵或胚胎干细胞移植至受体母体，产生出表达MICS1基因的转基因动物。本发明制备出的转基因动物可以作为分析MICS1的基因功能、研究疾病机理及进行相关药物筛选的模型。

技术领域

本发明涉及转基因动物技术领域，尤其是涉及一种MICS1心脏特异表达转基因动物的制备方法及应用。

背景技术

转基因动物指基因组中整合有外源基因，并能表达和遗传的一类动物。转基因体系打破了自然情况下的种系隔离，使基因能在种系遥远的机体间流动，既可加快家畜品种的改良力度，提高畜产品品质，又可生产珍惜药用蛋白，转基因技术是20世纪遗传学中继连锁分析，、体细胞遗传和基因克隆之后的第四代技术。

MICS1是一种新型线粒体分裂融合蛋白，位于线粒体的内膜，属于Bax inhibitor-1(Bi-1)超家族。当MICS1下调可导致线粒体结构被破坏，引起线粒体嵴的解体，并直接导致促凋亡蛋白从线粒体膜上释放，诱导细胞凋亡；而当其过表达则会将细胞色素c稳定于线粒体内膜，抑制细胞凋亡。然而，目前MICS1的相关功能尤其在心脏发育及心血管疾病的发生、发展过程中的作用尚不清楚。

针对现有技术中存在的上述问题，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种转基因动物的制备方法，该方法制备出的转基因动物的心脏组织内过表达MICS1基因。

本发明的另一个目的在于将通过本发明方法制备出的转基因动物用于探究MICS1基因表达蛋白的生理作用及信号途径，及其在心脏发育、心血管疾病发生机理以及临床前相关药物筛选。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

MICS1心脏特异表达转基因动物的制备方法，该方法包括将携带有MICS1基因的转基因载体引入受精卵或胚胎干细胞，将注射后的受精卵或胚胎干细胞移植至受体母体，产生出表达MICS1基因的转基因动物；

所述MICS1基因的序列如SEQ ID No.1所示。

优选地，所述携带有MICS1基因的转基因载体由如下步骤构建得到，将所述MICS1基因插入到TG载体上的α-MHC启动子的下游，使MICS1基因在α-MHC启动子作用下特异性表达。

优选地，所述转基因动物包括马、牛、山羊、绵羊、猴、兔、猪、犬、大鼠或小鼠。

优选地，所述受精卵或胚胎干细胞来源于啮齿动物，优选来源于小鼠。

优选地，所述受精卵选自小鼠C57BL/6J品系，ICR小鼠、FVB/N小鼠、129小鼠，BALB/c小鼠、DBA/1或DBA/2小鼠的受精卵。

优选地，所述胚胎干细胞选自C57BL/6J小鼠、129小鼠或BALB/c小鼠的胚胎干细胞。

优选地，所述将携带有MICS1基因的转基因载体引入受精卵的步骤包括将携带有MICS1基因的转基因载体通过DNA显微注射引入受精卵。

优选地，所述将携带有MICS1基因的转基因载体引入胚胎干细胞的步骤包括将携带有MICS1基因的转基因载体通过病毒感染胚胎干细胞引入。

优选地，所述转基因动物心脏组织特异性的过表达MICS1蛋白。

由上述方法制备出的转基因动物的应用：

I.所述转基因动物及其组织、器官或组织切片在制备研究MICS1基因在小鼠心脏内表达情况的模型中的应用；

II.所述转基因动物及其组织、器官或组织切片在研究过量表达MICS1蛋白对机体产生的效应中的应用。