[发明专利]一种提高水稻籽粒维生素含量的方法

权利要求书

1.一种提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.构建重组载体；

B.获得转基因植株；

C.收获单株自交种子；

D.T1代自交留种；

E.T2代自交留种；

F.表型选择。

2.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

A.构建重组载体：从拟南芥中分离出γ-生育酚甲基转移酶基因的cDNA片段；将它与水稻籽粒专一性谷蛋白GluB-1启动子酶切连接到表达载体pCAMBIA1300上，构建重组载体。

3.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

B.获得转基因植株：利用根癌农杆菌介导的转基因方法将重组载体导入水稻中，获得转基因植株。

4.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

C.收获单株自交种子：利用聚合酶链式反应对T0代转基因植株进行阳性检测，通过Northern杂交检测阳性转基因植株转入片段的表达，通过Southern杂交鉴定阳性转基因植株的整合拷贝数，选择含有单拷贝的转入片段，且正常结实的转基因植株，收获单株自交种子。

5.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

D.T1代自交留种：将步骤C选留的转基因植株的种子种成家系T1代，继续利用PCR对T1代单株进行阳性检测，利用Northern杂交方法对对阳性单株检测转入片段的表达，结合田间表现，选择多个表现优良的转基因单株，自交留种。

6.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

E.T2代自交留种：继续种植步骤4种选留的目标单株成T2代家系，利用PCR对T2代单株进行阳性检测，对阳性单株进行农艺形状考察和水稻种子维生素含量分析，从中选择表型稳定，维生素E含量和农艺形状有较大改善的纯合单株，自交留种。

7.根据权利要求1所述提高水稻籽粒维生素含量的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：

F.表型选择：对选留的纯合单株进行表型选择，培育新材料。

8.一种食品，其特征在于，采用如权利要求1～7中任一项所述提高水稻籽粒维生素含量的方法直接或间接生产而成。

9.一种如权利要求1～7中任一项所述提高水稻籽粒维生素含量的方法在生产用于食用或食品加工的稻米中的应用。

10.一种如权利要求1～7中任一项所述提高水稻籽粒维生素含量的方法在建立水稻品系中的应用。