[发明专利]一种改良稻米中淀粉品质的方法在审
| 申请号： | 201711499049.6 | 申请日： | 2017-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN108192911A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张国栋;刘佳音;张佩;邹丹丹;吴洁芳;王晶;罗碧;米铁柱 | 申请（专利权）人： | 青岛袁策生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/54;A01H5/10;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人： | 李冰 |
| 地址： | 266041 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水稻籽粒 重组载体 改良 构建 淀粉品质 农杆菌 纯合 单株 表达载体 表型选择 转化植株 作物品质 谷蛋白 启动子 专一性 转基因 酶切 稻米 转化 基因 申请 应用 | ||
1.一种改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
A.重组载体构建；
B.转化农杆菌的建立；
C.获得独立转化植株；
D.PCR扩增；
E.选择纯合单株；
F.选留的纯合单株进行表型选择。
2.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：A.重组载体构建和转化农杆菌的建立：将SBE1基因的cDNA与水稻籽粒专一性谷蛋白GluB-1启动子酶切连接到表达载体pCAMBIA1300上，构建重组载体。
3.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：C.获得独立转化植株：利用农杆菌介导的转基因方法将重组载体导入水稻中，获得转基因植株。
4.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：D.PCR扩增：利用聚合酶链式反应对T0代转基因植株进行阳性检测。
5.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：E.选择纯合单株：通过Northern杂交检测阳性转基因植株转入片段的表达，通过Southern杂交鉴定阳性转基因植株的整合拷贝数，选择含单考贝的转入片段、且正常结实的转基因植株，收获单株自交种子。
6.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：F.选留的纯合单株进行表型选择：将选留的转基因植株的种子种成家系T1代，继续利用PCR对T1代单株进行阳性检测，利用Northern杂交方法对阳性单株检测转入片段的表达，结合田间表现选择多个表现优良的转基因单株，自交留种。
7.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：F.选留的纯合单株进行表型选择：继续种植前述选留的目标单株成T2代家系，利用PCR对T2代单株进行阳性检测，对阳性单株进行农艺性状考察和水稻种子淀粉分析，从中选择表型稳定，淀粉品质和农艺性状有较大改善的纯合单株，自交留种。
8.根据权利要求1所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法，其特征在于，所述步骤进一步包括：F.选留的纯合单株进行表型选择：对选留的纯合单株进行表型选择，培育新材料。
9.一种如权利要求1～8中任一项所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法生产的用于食用或食品加工的大米。
10.一种如权利要求1～8中任一项所述改良水稻籽粒淀粉品质的方法在建立水稻品系中的应用。
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