[发明专利]一种共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法

权利要求书

1.一种共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法，其包括下述步骤：

1)绘制ΔI和不同浓度的壳聚糖的标准曲线：向10mL比色管中加入1.0mL一定浓度梯度的壳聚糖标准溶液，2.0mL甘氨酸-盐酸缓冲溶液，1.0mL浓度为1×10^-4mol/L苯胺蓝溶液，再加入一定量的胶体保护剂，使用蒸馏水定容后充分摇匀，100℃水浴加热10min，冷却至室温，取1ml混合溶液加入石英比色皿，于F-2500型荧光分光光度计上，以λ_ex＝λ_em进行同步扫描，分别记录含壳聚糖的各检测体系在最大共振瑞利散射波长λ＝349nm处体系的共振散射强度值I，其中试剂空白在λ＝349nm处体系的共振散射强度值I₀，并计算ΔI＝I-I₀，建立ΔI与壳聚糖浓度的标准曲线C；

2)10μg/mL的样品工作液的制备：将壳聚糖胶囊去胶囊壳，称取0.04g于100mL容量瓶中，用0.5mol/L冰醋酸溶解，定容得样品储备液；用漏斗脱脂棉过滤储备液，滤液经6000r/min，离心机离心20min，取上清液2.5mL于100mL容量瓶，定容，得浓度为10μg/mL的样品工作液；

3)样品中壳聚糖含量确定：取样品工作液1mL，按步骤1)检测方法进行测定，在λ＝349nm处分别测定含壳聚糖溶液的共振瑞利散射强度I和空白试剂的共振瑞利散射强度I₀，并计算ΔI＝I-I₀，将ΔI代入线性回归方程求得样品中壳聚糖的含量。

2.根据权利要求1所述的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法，其特征在于，所述的甘氨酸-盐酸缓冲溶液的pH为1.7。

3.根据权利要求1所述的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法，其特征在于，步骤1中溶液的加入顺序为首先加入壳聚糖溶液，再次加入甘氨酸-盐酸缓冲溶液，最后加入苯胺蓝溶液。

4.根据权利要求1所述的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法，其特征在于，所述的胶体保护剂是β-环糊精溶液或淀粉溶液。