[实用新型]一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及液体活检病理学检测技术领域，具体而言，涉及一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒。

背景技术

细胞异质性增生的结果是恶性肿瘤，来源于上皮组织的恶性肿瘤称为癌。癌症是人类的噩梦，其危害与日俱增。世界卫生组织(WHO)报道，当前全世界每年新发现癌症病人约1200万，死亡600万，平均每天有1.7万人死于癌症，每5分钟就有1人因癌症致死。预计未来25年全世界将有3亿人患肿瘤，其中1亿人因本病死亡。癌症将成为新世纪人类的第一杀手，并成为全球最大的公共卫生问题之一。

癌症防治的唯一出路为“三早”，即：早期发现、早期诊断、早期治疗。世界卫生组织明确指出：早期发现是提高癌症治疗率的关键。只要早期发现，90％的癌症完全可以治愈。认真做好癌症的早期发现、早期诊断及早期治疗工作，则癌症的死亡率可减少约三分之一。因此，提高癌症早期发现率刻不容缓。

提高癌症的早期发现率，必须采用灵敏度高、简便、无痛苦、价格低廉、易于接受的筛查方法，在大面积人群体检中普及，在众多无症状的人群中发现更多的早期癌症患者和癌症高危人群。随着人类基因组计划的完成和蛋白质组研究的开始，许多相关的新技术和新方法不断出现，通过寻找理想的肿瘤标志物用于常见肿瘤的筛查、早诊、预后判断及指导个体治疗都已逐渐成为可能，从而达到预测个体患恶性肿瘤的风险度，并对患者进行早诊早治。

但是，目前临床常用的检测细胞异质性增生的筛查方法比较繁琐，且相应的检测都是针对单个的标志物进行检测，检测结果的灵敏度和特异性并不高，对诊断结果不准确，不宜在普通人群中开展大规模的筛查。

有鉴于此，特提出本实用新型。

实用新型内容

原血红素是血红素家族的重要成员，是血红素在人体内的存在形式，是血红素结合蛋白(以原血红素为辅基的酶和细胞色素)的活性基。它由原卟啉Ⅸ与二价铁离子结合而成。据其分子结构和功能不同又分为原血红素a、b、c，在肿瘤发生过程中被释放，属于医学相关生物标志(medicine-related biomarker)。致癌因素导致细胞异质性增生，糖代谢异常，其耗糖量为正常细胞的十倍，且磷酸戊糖代谢途径旺盛，称为“瓦博格氏效应”。在高糖能量代谢电子传递过程中芬顿氏反应产生的羟自由基、过氧自由基等对线粒体造成氧化损伤，改变细胞蛋白的极性量值，使位居线粒体基膜中血红素结合蛋白疏水核(又称血红素口袋)中的原血红素释放，导致体液例如(组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等)中原血红素含量增加，其释放量与细胞癌变程度呈正相关。原血红素具有过氧化物酶的作用，可以使过氧化物脱氧，进而使供氢体氧化成含显色集团的物质。因为肿瘤细胞脱落，或者肿瘤组织炎性渗出，异质性增生的细胞进入人体的各种体液中，例如组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等。用比色法测定体液中原血红素含量，即可显示体液样本中的细胞是否存有异质性增生。

β-葡萄糖醛酸苷酶是细胞异质性增生过程中活性增强的一种生物标志物。它是由四个相同亚单位组成的糖蛋白，广泛存在于人体的各种组织及体液中，生理状态下具有参与细胞增生的作用，而在病理状态下，β-葡萄糖醛酸苷酶可以作用于葡萄糖醛酸甙的β一糖苷键，水解癌周结缔组织中的蛋白多糖及糖蛋白，破坏其网状结构的防御作用，有利于癌细胞的浸润与扩散。

有关恶性肿瘤β-葡萄糖醛酸苷酶活性增高的机制，一是为适应肿瘤生存引起的机体对酶代谢的改变，如癌细胞分泌β-葡萄糖醛酸苷酶增强，癌细胞膜对β-葡萄糖醛酸苷酶通透性改变，对该酶抑制剂的缺乏或增加；二是肿瘤组织浸润并且破坏周围正常组织，引起其它组织酶生成异常，或因肿瘤压迫梗阻引起该酶的大量释放，造成β-葡萄糖醛酸苷酶增高。

通过联合应用形态学细胞水平的免疫组化技术、亚细胞水平的免疫电镜技术和机能学的ELISA技术，对恶性肿瘤组织及相关体液中β-葡萄糖醛酸苷酶进行的同步检测显示，β-葡萄糖醛酸苷酶在恶性肿瘤患者组织及相关体液中增高，是由癌细胞自身的生物学特性决定的，缘于肿瘤细胞为适应其快速过度增殖和异常分化的自主性生长的生存方式而产生的自我调控，由其自身独特的生长方式决定并成为内因的。在最适温度与PH条件下，酚酞葡萄糖醛酸甙经β-葡萄糖醛酸苷酶催化水解，释放出游离酚酞。加碱性溶液终止反应，酚酞呈红色。观察酚酞指示的颜色变化，即可了解体液样本中β-葡萄糖醛酸苷酶的活性，显示细胞是否存有恶变及其程度。