[实用新型]一种遗传性耳聋单基因检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及基因检测领域，具体而言，涉及一种遗传性耳聋单基因检测试剂盒。

背景技术

听觉系统中传音、感音及其听觉传导通路中的听神经和各级中枢发生病变，引起听功能障碍，产生不同程度的听力减退，统称为耳聋。耳聋是严重影响人类健康和生活质量的最常见的疾病之一，估计全世界现有7亿多人有中度以上(55dB)的听力损失。据我国2006年第二次全国残疾人抽样调查显示，听力语言残疾者达2780万人，其中单纯听力残疾2004万，占全国8296万残疾人的24.16％。在这些听力残疾者人群中0～6岁听障儿童80万，6～14岁听障儿童11万，每年新生聋儿3万(不包括迟发性聋以及药物性聋)。据统计，约60％耳聋由遗传因素导致的，其中约70％为非综合征型耳聋。非综合征型耳聋具有高度的遗传异质性，可以多种方式遗传给下一代，包括：常染色体显性遗传(DFNA)，占20％～25％；常染色体隐性遗传(DFNB)，占75％～80％；X连锁遗传(DFN)，占1％；线粒体突变母系遗传，约为1％；Y连锁遗传(相关染色体位点命名为DFNY)，目前只有王秋菊等报道过一个中国耳聋相关家系；其中，常染色体隐性遗传性耳聋，多表现为学语前耳聋；常染色体显性遗传性耳聋则多表现为学语后的进行性发展的耳聋。

遗传性耳聋可由多种基因导致。根据症状可分为非综合征型耳聋(nonsyndromic hea；ringloss，NSHL)和综合征型耳聋(syn化omichea；ringloss，SHL)。至2014年10月为止共定位NS化基因位点有145个，包括DFNA位点57个，DFNB位点80个，DFN位点5个，DFNY位点1个，修饰基因位点2个。近期在我国国内开展的大规模耳聋分子流行病学研究表明：我国非综合征性耳聋主要由GJB2、GJB3、SLC26A4、mtDNA 12srRNA等基因引起，其中GJB2基因突变为一个重要的隐性遗传基因。

耳聋的高发生率及高度的遗传异质性，要求建立切实有效的基因检测方法，有效的基因检测和预防措施对于减少耳聋的发生具有重大的作用。

Sanger测序法是基因突变/多样性检测的金标准，具有技术和平台成熟、结果准确和全面等优点，非常适合于检测遗传性耳聋相关的基因突变位点。现有技术中基于Sanger测序法的遗传性耳聋单基因检测试剂盒需使用多种试剂，得到多组检测结果，需使用多个试剂容器分装，携带和储存都不方便。

有鉴于此，特提出本实用新型。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种遗传性耳聋单基因检测试剂盒，所述的试剂盒可通过Sanger测序法对GJB2基因的突变位点进行筛查以预测或鉴定遗传性耳聋，具有携带、储存方便安全、操作简便、能够用一份标本多项检测、结果显示迅速等优点。

为了实现本实用新型的上述目的，特采用以下技术方案：

一种遗传性耳聋单基因检测试剂盒，包括盒体，第一试剂瓶、第二试剂瓶、第三试剂瓶、双蒸水试剂瓶、酶管、MIX管、20μL EP管、引物管；

所述酶管、MIX管收纳于纸盒中；

所述20μL EP管放置于第一EP管架上；

所述引物管放置于第二EP管架上；

所述盒体内设置有第一抽屉层及第二抽屉层；所述第一抽屉层及所述第二抽屉层的内底壁上设置有固定层；所述固定层上设置有多个凹槽；且所述固定层与所述第一抽屉层及所述第二抽屉层的内侧壁相贴；

所述第二抽屉层内设置第一区域及第二区域；

所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶、所述第三试剂瓶、所述双蒸水试剂瓶分别插入所述第一区域中对应的凹槽中；

所述纸盒插入所述第二区域中对应的凹槽中；所述第二区域中设置有冰盒放置位；

所述第一EP管架、所述第二EP管架分别插入所述第一抽屉层对应的凹槽中。

本实用新型首先涉及一种基于Sanger测序灵敏检测人类GJB2基因突变的试剂盒。在进行检测时，需要将目的基因片段扩增体系中加入了所述的连接引物组、耐热DNA连接酶及其缓冲液。

优选的，如上所述的遗传性耳聋单基因检测试剂盒，所述第一抽屉层设置在所述第二抽屉层的上方。

由于所述第二区域中往往需要盛放干冰等物质，为了使得试剂盒重心稳固，所述第一抽屉层设置在所述第二抽屉层的上方。

优选的，如上所述的遗传性耳聋单基因检测试剂盒，所述第一区域和所述第一抽屉层的固定层为海绵固定层。