[实用新型]一种用于肾衰检测的多指标快速定量检测胶体金试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及生物技术诊断领域，具体涉及一种用于肾衰检测的多指标快速定量检测胶体金试剂盒。

背景技术

肾衰是一个连续性过程，广泛发生于糖尿病人、交通事故伤害、重症患者、大手术后患者，它按FIFLE标准分为风险、损伤、衰竭、肾功能丧失和终末期肾病。现有技术中，临床检测肾衰的生物标志物是肌酐、尿素氮和尿量。而这些传统指标因为其影响因素较多，造成特异性偏低，导致以肌酐等作为肾衰诊断标志存在严重的局限性。

肾衰的早期发生、发展过程包括肾小管损伤、肾小球滤过功能下降，肾衰过程的检测有助于对病人实施保护性治疗，阻止肾脏功能的进一步恶化。鉴于现有临床面临的这些问题，新的早期急性肾损伤的生物标志物已被逐步开发出来。包括肾损伤分子-1(Kim-1)、中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)和视黄醇结合蛋白（RBP）。

肾损伤分子-1(Kim-1)是由334个氨基酸残基组成的Ⅰ型跨膜蛋白，在正常的肾组织中几乎不表达，当肾脏发生缺血及肾损伤后，在人近曲小管上皮细胞中呈高表达状态。肾小管受损后第1天KIM-1升高至少5倍以上，而血清肌酐与尿素氮晚到受损后第3天才升高，因此Kim-1是监测早期肾小管损伤的最敏感的标志物之一。Kim-1分子的细胞外ectodomain(金属蛋白酶水解脱下来的，可以分泌到尿液中)是急性肾衰竭 (AKI)的定量标志物，尿中KIM-1的检测不受尿液理化物质的影响，心脏手术后几个小时就会检测到Kim-1在尿液中大幅增长现象。肾脏缺血时尿Kim-1水平升高，具有较高的特异性，对于AKI患者而言，高水平Kim-1预示患者的预后较差。临床实验证明，Kim-1是早期肾小管损伤最敏感的标志物之一。

中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)是一种小分子量分泌型蛋白，由Kjeldsedn等人于1993年发现，是Lipocalin家族的新成员。生理条件下，NCAL少量合成于骨髓中性粒细胞和肾小管等多个系统的上皮细胞，炎症反应和恶性肿瘤可诱使其在多组织(如子宫、前列腺、唾液腺、肺、肾、气道及消化道上皮等)中大量生成，几个小时内就可以达到峰值，产生速度明显快于其它相关生物标记物。NGAL在急性肾小管损伤早期就已经表达，反映肾小管功能紊乱，它浓度的升高提示肾小管损伤发生，而传统指标血肌酐升高则需24小时以上。NGAL也是目前新型AKI诊断的首选指标物。

视黄醇结合蛋白（RBP）是一种分子量约为 21KD 的小分子量蛋白，主要由肝细胞合成，广泛分布于血液、脑脊液等各类体液，血液中的 RBP 常与视黄醇及甲状腺转运蛋白结合形成三元复合体，结合状态的 RBP 无法从肾小球滤过。当肾脏滤过功能降低时,肾小球滤过率和肾血流量降低而使血中各种形式的视黄醇结合蛋白（RBP）贮积而显示血清RBP浓度升高。在慢性肾小球肾炎中, 血清RBP与肾功能相关性好,可以作为肾小球滤过功能受损的敏感指标。正常人尿中视黄醇结合蛋白（RBP）含量很少，约为0.1ug/min以下，其水平增加被认为是一种敏感的近端肾小管损伤的诊断指标。RBP与尿白蛋白、NAG、β2-微球蛋白等有显著的正相关。而尿RBP作为肾小管损伤的指标较NAG敏感。在疾病状态下，尿RBP浓度又是NAG的10倍。因此，尿RBP的测定比NAG和β2-MG更有价值。当肾脏疾患或感染等导致肾小管重吸收功能障碍时,尿中RBP 浓度升高,因此尿中RBP 测定是诊断早期肾小管损伤的敏感指标。

发明内容

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种用于肾衰检测的多指标快速定量检测胶体金试剂盒，其通过同时检测Kim-1、NGAL和RBP的指标变化，可准确地检测早期肾小管的损伤，具有特异性强、准确性高的特点，用一滴血、一滴尿实现家庭检测和现场检测，避免肾衰的进一步发生，具有极高的社会效益。

为解决以上技术问题，本实用新型采用如下技术方案：

一种用于肾衰检测的多指标快速定量检测胶体金试剂盒，其包括检测卡、比色卡和/或胶体金定量读数仪，检测卡包括上样垫、胶体金结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸样垫及底板，检测指标包括肾损伤分子-1、中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白、视黄醇结合蛋白，胶体金结合垫包括结合垫本体和涂覆于结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层，其中胶体金标记抗体涂层中的抗体为所述指标的抗体；检测线有三条，这三条检测线相互分离且分别为能够与胶体金标记的抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。

根据本实用新型的一个具体方面，检测卡由上样垫、胶体金结合垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上构成。