[实用新型]一种肿瘤细胞团的简便分选过滤装置有效
申请号: | 201721033350.3 | 申请日: | 2017-08-17 |
公开(公告)号: | CN206666531U | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 万勇;陈少琅;吴英松;李明;谭婷婷 | 申请(专利权)人: | 广州市达瑞生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12N5/09 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人: | 任重 |
地址: | 510670 广东省广州市高*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肿瘤 细胞 简便 分选 过滤 装置 | ||
技术领域
本实用新型属于细胞分选技术领域。更具体地,涉及一种原代癌组织来源或癌细胞团体外培养物中的细胞团(多细胞球体)分选过滤装置。
背景技术
我国是全球癌症高发国家,癌症的发病率和死亡率一直在上升,已经成为当前我国居民主要的致死原因之一,临床上最常见恶性肿瘤主要为实体恶性肿瘤。诱发实体恶性肿瘤的原因很多,目前大多数实体恶性肿瘤发病机理尚不清楚,传统癌症治疗主要依赖手术、化疗、放疗,其中化疗作为最常用的全身治疗手段,广泛应用于癌症治疗的各个阶段,在癌症治疗中有着举足轻重的作用。然而,由于化疗个体化差异大,临床化疗疗效有限,如果患者选择了不适合的化疗方案,可能适得其反,难以从中获益。利用化疗药敏检测技术指导临床个体化化疗实践,帮助患者选择合适的化疗药物,减轻患者的化疗不良反应和经济负担。目前的药敏检测技术种类繁多,其中胶原凝胶滴包埋药敏检测技术(CD-DST)是一种新型体外药敏检测技术,采用原代肿瘤细胞团体外三维立体培养,进行药物评价,可有效模拟人体内肿瘤微环境,获得接近于人体的药物敏感性检测数据,因而有着广阔的临床应用前景。
不过,目前市面上尚无真正针对肿瘤细胞团的专用分选装置,传统的细胞团分选过程复杂,主要存在问题有:1)细胞悬液多次反复离心,过滤时滤过性差,细胞易丢失,细胞回收率低;2)操作时间长,对肿瘤细胞活性损伤大,回收细胞活性差异大;3)回收样品过滤后的滤过液,细胞团的大小差异较大,均一性不好,这些问题对后续药敏检测试验的质量控制存在不良影响。因此,最大限度的提高有限体积/重量的原代癌组织中细胞团的回收数量、细胞活性及细胞团大小的均一性,是目前本领域技术人员亟待解决的问题。
此外,近年来关于肿瘤微环境的研究日益兴起,在体外采用细胞系或原代癌细胞三维培养,构建多细胞球体模型,研究肿瘤微环境对肿瘤发生、发展、治疗等方面的影响,也需要一种快速可靠的分选工具。
发明内容
本实用新型要解决的技术问题是克服现有肿瘤细胞团获取方式的缺陷和技术不足,提供一种适用于癌组织来源或体外培养肿瘤细胞团的简便分选过滤装置,可有效提高肿瘤细胞团回收效率、细胞团活性及细胞团均一性。本发明的应用,可有助于临床科研人员克服实际工作中肿瘤细胞团回收的困难,提高试验的成功率和可重复性。
本实用新型上述目的通过以下技术方案实现:
一种肿瘤细胞团(多细胞球体)分选过滤装置,包括依次可拆卸式连接的过滤件一1、过滤件二2和连接管3;所述过滤件一1和过滤件二2的上端均开口,底部均为倾斜式滤网,过滤件一1的滤网孔径为300~500μm,过滤件二2的滤网孔径为20~60μm;所述连接管3顶部还设置有漏斗4,漏斗4上端与过滤件二2的滤网相连;连接管外壁上还设置有管嘴5,管嘴5的位置高于漏斗4的下端;即漏斗与连接管外壁之间形成中空夹层,管嘴5与中空夹层相通。
该装置使用时,将消化处理后的新鲜肿瘤组织分散液或培养后回收的肿瘤细胞团悬液加入过滤件一1中,通过滤网进行分离,组织分散液中的脂肪组织、膜组织、结缔组织等大的组织块或杂质首先被过滤件一1截留,而细胞团、单细胞及细胞裂解碎片等细小杂质一起进入过滤件二2,其中适中大小的细胞团被过滤件二2截留,而单细胞及细小杂质穿过滤网流入连接管3中被去除。然后取出过滤件二2,倒置冲洗后,即可获得所需细胞团。
该装置有效减少了对癌组织或细胞进行反复吹打、过滤、离心等操作次数,新鲜肿瘤组织分散液或培养后的肿瘤细胞团悬液加入后一次性过滤即可获得所需大小均匀的细胞团,可显著降低因反复离心带来的细胞团回收数量的减少以及反复操作对细胞团活性的损伤。而且过滤件二2还可有效去除单细胞及细小杂质颗粒,避免细小杂质颗粒过多造成对后续试验产生背景信号干扰,实现整体上规范细胞团的分选流程,提高试验过程质量的可控性。
另外,使用时,管嘴5可与真空泵相连接,可形成一定的负压(压力)保证组织分散液通过漏斗向下流,克服细胞悬液表面张力较大,难以通过自身重力作用穿过滤网的问题。同时,管嘴5的位置不低于漏斗4的底部以上1/3高度(即管嘴5内端在漏斗与外壁之间的中空夹层中),保证不会将滤液吸入真空泵,形成二次污染。
更优选地,所述连接管3包括连接部31和底管32,所述漏斗4和管嘴5均设置在连接部31上。底管32可以是现有市购的离心管(如50mL离心管),如此底管利用现有的离心管即可(因这里只是收集废液,在保证气密性的前提下,离心管可重复使用),以便降低成本。
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