[实用新型]一种检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置

说明书

本实用新型公开了一种检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置，所述装置包括下室和上室，在所述下室和上室之间设置有过滤室，过滤室的底面形成第二有机材料膜，第二有机材料膜的孔径为20‑50um；所述上室的底面形成第一有机材料膜，第一有机材料膜的孔径为8‑12um。本实用新型巧妙地将肿瘤细胞成球实验和Transwell侵袭迁移实验融合，同一装置既可验证干细胞的成球能力又可验证干细胞的侵袭迁移能力，提高了实验的成功率和效率。

技术领域

本实用新型设计细胞学装置，具体是一种检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置。

背景技术

肿瘤干细胞对肿瘤的存活、增殖、转移及复发有着重要作用。从本质上讲，肿瘤干细胞通过自我更新和无限增殖维持着肿瘤细胞群的生命力；肿瘤干细胞的运动和迁徙能力又使肿瘤细胞的转移成为可能。因此肿瘤干细胞常常存在于缺氧小生境、血管小生境、侵袭小生境中，可以长时间处于休眠状态并具有多种耐药分子而对杀伤肿瘤细胞的外界理化因素不敏感，导致肿瘤复发、迁移，以致难以治愈。可见肿瘤干细胞是一群既具有自我更新能力又具有较强的侵袭迁移的细胞，而目前的实验均只能单方面证明肿瘤干细胞的自我更新能力或侵袭迁移能力。肿瘤细胞的成球实验（成球大小及数目）和Transwell侵袭迁移实验分别是衡量肿瘤细胞干性及迁移运动能力的金标准，但均具有缺陷性。

在经典的肿瘤干细胞成球实验中，将肿瘤细胞放在干细胞培养基中培养，通常第二天即可观察到细胞球形成（具体成球时间依细胞类型而定）。通过显微镜下观察细胞球直径与个数来判断该细胞在该环境中的自我更新能力。然而形成的细胞球可能并未具有高侵袭迁移能力，并非所谓的具有高运动迁移能力的干细胞，即出现假阳性结果。而在经典的Transwell侵袭迁移实验中，对于多见的贴壁细胞，常用且普遍采用的是将细胞种在Transwell小室，在血清或趋化因子的诱导下细胞穿过小室薄膜并在小室底面贴壁生长，然后进行经典染色操作（结晶紫或DAPI）去计数穿过小室的细胞数量。然而对于干细胞因其悬浮生长的特点，不贴壁，所以在经典的实验操作过程中极易造成细胞球的丢失（随着下室培养基一起倒掉），实验结果也就毫无说服力。尽管大多数文献报道通过对下室培养基中悬浮细胞数目计数来观察细胞的侵袭迁移能力，但其可行性及利用率（细胞数量少误差大，丢失多，不利于观察等缺陷）远远低于贴壁细胞Transwell实验；有些学者则运用血清或人脐静脉上皮细胞共培养来趋化干细胞向下室运动，但其均可导致干细胞分化而影响实验结果的准确性。

实用新型内容

本实用新型就是为了解决经典的干细胞成球实验和Transwell侵袭迁移实验只能单方面检测肿瘤干细胞成球能力或迁移运动能力的问题，所提出的一种检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置。

本实用新型是按照以下技术方案实现的。

一种检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置，包括下室和上室，在所述下室和上室之间设置有过滤室，过滤室的底面形成第二有机材料膜，第二有机材料膜的孔径为20-50um；所述上室的底面形成第一有机材料膜，第一有机材料膜的孔径为8-12um。

进一步的，所述上室为上端开口的圆台型结构，其上缘均布多个弧形缺口且沿上室的外圆周壁均布多个挂件，弧形缺口与挂件交错分布。

进一步的，所述过滤室为上端开口的圆台型结构，其上缘向外形成凸台。

进一步的，所述第二有机材料膜的孔径为20um。

进一步的，所述第一有机材料膜的孔径为8um。

本实用新型获得了如下的有益效果。