[实用新型]过滤吸附式核酸快速提取装置有效
申请号: | 201721649121.4 | 申请日: | 2017-12-01 |
公开(公告)号: | CN207699577U | 公开(公告)日: | 2018-08-07 |
发明(设计)人: | 钱志平;惠李;杜向东 | 申请(专利权)人: | 钱志平 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12M1/00 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 215000*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 吸附柱 核酸 快速提取装置 过滤吸附 上方部件 过滤器 本实用新型 下部管体 过滤膜 超声波熔接 注射器头部 残留液体 上部管体 塑料压环 下方部件 仪器设备 离心机 吸附膜 螺纹 注射器 扩增 滤板 吸头 密封 样本 并用 节约 应用 | ||
本实用新型公开了过滤吸附式核酸快速提取装置,包括注射器、过滤器、过滤膜、吸附柱上方部件、吸附膜、滤板、吸附柱下方部件和吸头,其中,吸附柱上方部件包括上部管体和下部管体,下部管体外层带有螺纹;过滤器分成圆形的上下两部分,上部分与注射器头部相连,下部分与吸附柱上方部件相连接,上下部分之间放置过滤膜并用超声波熔接密封。本实用新型旨在提供一种过滤吸附式核酸快速提取装置,可以直接快速地提取样本中的核酸,其提取过程无需使用离心机等仪器设备,节约了大量时间,简化了许多操作步骤,适用于现场和一些特殊场合应用,同时取消了塑料压环,能够有效避免残留液体对扩增环境的影响,提高了实验的准确性。
技术领域
本实用新型涉及分子生物学技术领域,具体涉及过滤吸附式核酸快速提取装置。
背景技术
从各种生物样本中提取核酸,在分子生物学技术领域中已经成为最基本和最常用的技术。目前提取核酸的方法主要有以下几种:
1.有机提取法
基本原理:苯酚使蛋白变性,SDS裂解细胞膜,蛋白酶K和EDTA消化蛋白或多肽或小肽,核蛋白变性降解使DNA从核蛋白中游离出来。利用DNA易溶于水,不溶于有机溶剂的特性提取DNA。
2.螯合树脂法
基本原理:以主要使用的螯合树脂chelex-100为例,其含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。在低离子强度、碱性及煮沸下可以使细胞膜裂解,并使蛋白变性,DNA游离。
3.无机提取法
基本原理:利用NaCI或醋酸钠沉淀蛋白,经离心,用无水乙醇沉淀提取DNA。
4.差异裂解提取法
基本原理:利用某些生物样本的细胞膜易于破碎,另一些生物样本的细胞不容易破碎的特点,使用常规方法先去除易于破碎细胞,再用特殊试剂裂解不容易破碎细胞,再提取其中的DNA。
5.磷酸盐缓冲液法
基本原理:细胞在含非离子去垢剂和蛋白酶K的溶液中消化后,高温加热使蛋白质及蛋白酶K失活,离心沉淀分离蛋白质,从离心上清液中提取DNA。
6.甲酰胺解聚法
基本原理:甲酰胺可裂解DNA与蛋白质的复合物,又可变性沉淀释放的蛋白质,但对蛋白酶K的活性无显著影响。用高难度甲酰胺裂解染色质中DNA与蛋白质,然后用火棉胶袋进行充分透析去除蛋白酶K及有机溶剂。此法适合于构建高容量载体的基因组DNA文库及进行大片段的脉冲场凝胶电泳分析。
7.玻璃棒缠绕法
基本原理:DNA会沉淀于细胞裂解液和乙醇的交界面,用带钩的玻璃棒将大片段DNA从无水乙醇中转移至PH8.0的TE液中。此法适用于构建基因文库,PCR扩增,适合于同时从不同细胞或组织标本中提取DNA。
8.基于二氧化硅吸附提取核酸的方法
基本原理:利用二氧化硅吸附核酸的特性,生物体经异硫氰酸胍,roton X-100的Tris-HCl-EDTA处理后核酸与二氧化硅结合,再经含有异硫氰酸胍的Tris-HCl缓冲液和70%乙醇以及丙酮分别洗涤,最后用TE洗脱,获取核酸。
9.玻璃纤维膜吸附法
基本原理:玻璃纤维膜具有与核酸可逆性结合的特点,生物体裂解液中的DNA在促吸附液的作用下与玻璃纤维膜结合,用去蛋白液去除玻璃纤维膜上吸附的蛋白及其他杂质,再用洗涤液再次清洗玻璃纤维膜上吸附的蛋白及其他杂质,最后用洗脱液将玻璃纤维膜上吸附的核酸洗脱下来。
10.磁珠法
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