[实用新型]半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条

说明书

本实用新型公开了一种半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条，包括底板，样品垫、金标垫、检测垫和吸水垫，其中，检测垫位于底板的中段，金标垫覆盖在检测垫的端部及对应的底板上，样品垫由底板的一端向中段延伸，其端部覆盖在金标垫的端部，吸水垫由底板的另一端向中段延伸，其端部覆盖在检测垫的另一端部；金标垫端部与吸水垫端部之间外露的检测垫自靠近吸水垫端依次设有与底板端面平行的质控线、检测线T3、检测线T2和检测线T1；所述质控线上喷涂羊抗小鼠IgG抗体，检测线T1、检测线T2和检测线T3上分别喷涂有三唑磷半抗原‑鸡卵清蛋白偶联物，所述金标垫上喷涂有胶体金标记的三唑磷单克隆抗体。

技术领域

本实用新型涉及一种半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条，尤其是用于对蔬菜水果中三唑磷农药的快速筛选检测的试纸条，属于金标免疫检测领域。

背景技术

三唑磷农药作为一种中毒广谱有机磷杀虫剂，具有强烈的触杀和胃毒作用，渗透性较强，兼具一定内吸作用的特点，主要用于防治鳞翅目害虫、害螨等，在蔬菜、水果、茶叶等农作物生产中得到广泛的使用。但其残留期长，对环境生态系统及人类健康存在危害风险。日本和欧盟等国家和组织对三唑磷农药在蔬果上的残留制定了严格限量标准，我国也对该农药制定了限量标准（GB 2763-2016）。农业部公告第2032号：2016年12月31日起，禁止三唑磷在蔬菜上使用。

目前报道的三唑磷农药的检测方法，主要包括仪器分析方法、免疫化学等方法。然而，这些检测技术虽然准确性高、专一性强，但样品前处理过程复杂，耗时长，需要昂贵的仪器和专业技术人员，对大批量样品的现场快速检测和监测的响应相对滞后。

胶体金免疫层析技术是20世纪80-90年代发展起来的一种快速简易免疫检测技术，具有快速、简便、易判断等优点。其是将特异性的抗原固定在硝酸纤维素膜上，胶体金标记抗体吸附在金标垫上，当待检样液接触到试纸条金标垫端部，通过毛细作用向上移动，检测物与金标垫上的胶体金标记抗体反应结合，再移动至检测带（固定的免疫原区域），此时固定的免疫原与待检物竞争结合抗体，未与待测物结合的金标抗体与免疫原发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，从而产生颜色变化，当抗体与待测物复合物或游离的抗体到达质控带（固定的第二抗体）时，第二抗体与第一抗体发生特异性结合而被截留在检测带上，胶体金聚集呈现红色，随后可通过肉眼观察检测带的颜色变化，进行阳性判断。目前，针对三唑磷农药的多检测线试纸尚未见报道。

发明内容

本实用新型提供了一种快速诊断及半定量检测三唑磷农药残留的试纸条制备及应用方法，可满足现场快速筛查的要求。

上述发明目的是这样实现的：

一种半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条，包括PVC底板，样品垫、金标垫、检测垫和吸水垫，其特征在于，检测垫的材质为硝酸纤维素膜，其位于PVC底板的中段，金标垫覆盖在检测垫的端部及对应的底板上，样品垫由底板的一端向中段延伸，其端部覆盖在金标垫的端部，吸水垫由底板的另一端向中段延伸，其端部覆盖在检测垫的另一端部；

金标垫端部与吸水垫端部之间外露的检测垫自靠近吸水垫端依次设有与底板端面平行的质控线、检测线T3、检测线T2和检测线T1；所述质控线上喷涂羊抗小鼠IgG抗体，检测线T1、检测线T2和检测线T3上分别喷涂有三唑磷半抗原-鸡卵清蛋白偶联物，所述金标垫上喷涂有纳米金标记的三唑磷单克隆抗体。

进一步，本实用新型所述半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条中，样品垫和金标垫端部覆盖部分宽度为1 mm，金标垫和检测垫端部覆盖部分宽度为1 mm，检测垫和吸水垫端部覆盖部分为1 mm。

进一步，本实用新型所述半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条中，所述底板为宽3.5 mm的条形PVC底板；吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫均覆于底板一面并与底板等宽，他们的长度分别为17 mm、25 mm、8 mm和17 mm。