[发明专利]通过生物合成方法制造辣椒酯类物质的方法

权利要求书

1.一种产生辣椒酯类物质的方法，所述方法包含：

(a)在细胞系统中表达辣椒素酯合成酶(CS)；

(b)向所述细胞系统中添加8-甲基-6-壬烯酰基-CoA和香草醇；以及

(c)培育所述细胞系统足够的时间以产生所述辣椒酯类物质。

2.一种产生二氢辣椒素酯的方法，所述方法包含：

(a)在细胞系统中表达辣椒素酯合成酶(CS)和酰基转移酶(ACS)；

(b)向所述细胞系统中添加8-甲基壬酸和香草醇；以及

(c)培育所述细胞系统足够的时间以产生所述二氢辣椒素酯。

3.一种产生辣椒素酯的方法，所述方法包含：

(a)在细胞系统中表达辣椒素酯合成酶(CS)和酰基转移酶(ACS)；

(b)向所述细胞系统中添加6E-8-甲基壬烯酸和香草醇；以及

(c)培育所述细胞系统足够的时间以产生所述辣椒素酯。

4.一种产生辣椒酯类物质的方法，所述方法包含：

(a)在细胞系统中表达辣椒素酯合成酶(CS)和酰基转移酶(ACS)；

(b)向所述细胞系统中添加中链脂肪酸和香草醇；以及

(c)培育所述细胞系统足够的时间以产生所述辣椒酯类物质。

5.根据权利要求1到4中任一项所述的方法，其中所述CS氨基酸序列是来源于辣椒属(Capsicum genus)植物。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述辣椒属植物是魔鬼辣椒植物。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的方法，其中所述CS包含与SEQ ID NO：1具有至少90％一致性的氨基酸序列。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述CS包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。

9.根据权利要求2到8中任一项所述的方法，其中所述ACS氨基酸序列是来源于辣椒属植物。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述辣椒属植物是魔鬼辣椒植物。

11.根据权利要求2到10中任一项所述的方法，其中所述ACS包含与SEQ ID NO：2具有至少90％一致性的氨基酸序列。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述ACS包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

13.根据权利要求1到12中任一项所述的方法，其中所述细胞系统是选自包括酵母菌、非辣椒酯类物质产生植物、海藻和细菌的群组。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述细胞系统是细菌。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述细胞系统是大肠杆菌(E.Coli)。

16.根据权利要求1到15中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包含收集所述所产生的辣椒酯类物质、辣椒素酯或二氢辣椒素酯。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述方法进一步包含将所述所产生的辣椒酯类物质、辣椒素酯或二氢辣椒素酯纯化到大于70％的纯度。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述纯化步骤包含酸-碱提取。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述纯化步骤包含真空蒸馏。

20.根据权利要求17所述的方法，其中所述纯化步骤包含半制备型HPLC。