[发明专利]包含肉毒杆菌毒素的组合物

说明书

本发明涉及包含(a)肉毒杆菌毒素和(b)非交联的透明质酸的组合物及其治疗或预防肌张力障碍、痉挛状态和/或皱纹的用途。此外，本发明涉及用于在美容上平滑或预防皱纹的方法，其包括施用本发明组合物的步骤。

技术领域

本发明涉及包含(a)肉毒杆菌毒素和(b)非交联的透明质酸的组合物及其用于治疗或预防肌张力障碍、痉挛状态和/或皱纹的用途。此外，本发明涉及用于在美容上平滑或预防皱纹的方法，其包括施用本发明组合物的步骤。

背景技术

“肉毒杆菌神经毒素”(BoNT)可被视为一组几种非常相似的神经毒蛋白的总称。天然存在的肉毒杆菌神经毒素由厌氧和产芽孢细菌肉毒梭菌(Clostridium botulinum)产生，并且很少由其他梭菌属物种，例如丁酸梭菌(C.butyricum)、巴氏梭菌(C.barati)和阿根廷梭菌(C.argentinense)。目前存在八种不同的毒素血清型，称为A、B、C₁、C₂、D、E、F和G型。其中一些类型如A、B、E和F型对人类有毒，而C、D和G型更经常导致例如在鸟类、马、牛和灵长类动物中的毒性。

肉毒杆菌毒素复合物以包含两种组分的高分子蛋白质复合物的形式存在；即具有麻痹作用的神经毒素组分和相关的无毒细菌蛋白质组分，其可被视为包括血凝素和非血凝素蛋白的外壳蛋白。肉毒杆菌毒素复合物的分子量在不同肉毒杆菌毒素血清型A、B、C₁、C₂、D、E、F和G型中从约300kDa到约900kDa不等。关于治疗应用，外壳蛋白据报道不具有显著的功能，并且对神经毒性性质没有贡献。神经毒素组分表达为对于所有已知肉毒杆菌毒素血清型具有约150kDa的分子量的无活性单链前体(非裂解多肽)。该单链前体通过溶蛋白性裂解而活化，以生成二硫键连接的双链蛋白质。约50kDa的轻链蛋白质含有催化结构域并且是含锌金属蛋白酶，并且充当锌内肽酶。约100kDa的重链蛋白质包含易位结构域和受体结合结构域。重链介导与突触前胆碱能神经末梢结合，特别是与运动终板或神经肌肉接头的突触前部分结合，以及毒素内化进入细胞内。

关于前面提到的，当转运到神经肌肉接头时，重链的受体结合结构域提供胆碱能特异性并且使毒素与突触前受体结合。随后，神经毒素可经由受体介导的内吞作用进入神经元细胞，并且停留在神经元细胞的内吞囊泡内。在囊泡酸化后，轻链易位到细胞质内并分离。轻链蛋白质是充当锌内肽酶，并且能够分裂囊泡融合器的不同蛋白质并预防囊泡的胞吐作用的子区段。特别地，取决于BoNT血清型，轻链毒性部分能够切割形成SNARE蛋白复合物的一种或多种蛋白质，其中所述SNARE复合物由SNAP-25、突触融合蛋白(syntaxin)和VAMP形成。SNARE复合物通常与膜融合，并且因此允许神经递质乙酰胆碱离开细胞。通过释放突触间隙中的神经递质乙酰胆碱，将神经冲动传递到肌肉，这给肌肉发信号以收缩。由于SNARE复合物的形成基本上通过经由例如BoNT/A从所述复合物中切割蛋白质来预防，所以乙酰胆碱释放被终止。因而，神经和肌肉之间的传递受阻，这最终引起瘫痪(肉毒中毒)。

然而，尽管其高毒性，但是自20世纪80年代初以来，肉毒杆菌毒素已用作批准的活性药物成分，特别是在特定的运动障碍，如眼睑痉挛(睑痉挛)或斜颈(斜颈痉挛)治疗中。另外，肉毒杆菌毒素用于美容医学领域，例如美容治疗中。另外，眉间皱纹的治疗推测进一步发挥心理作用。特别地，这种治疗据报道减轻与严重抑郁障碍有关的症状。

肉毒杆菌神经毒素是固有地不稳定的，特别是在碱性条件下。进一步地，它们据报道是热不稳定的。为此目的，商业肉毒杆菌神经毒素经常作为真空干燥或冻干材料贮存，并且经常另外含有赋形剂，以便保存肉毒杆菌神经毒素在贮存以及潜在的后续重构过程中的完整性和效力。