[发明专利]细胞冻存用培养基组合物及其应用

说明书

本发明涉及细胞冻存用培养基组合物，以及包括所述培养基组合物和治疗性细胞的药物组合物，所述培养基组合物表现出优异的细胞复苏率、细胞存活率和解冻后的细胞活性。此外，本发明的所述培养基组合物使得冻存的治疗性细胞容易施用给受试对象而无需诸如洗涤、分离等的额外步骤。因此，所述培养基组合物可以作为用以细胞冻存的优良培养基组合物或者作为良好的治疗性组合物。

技术领域

本发明涉及细胞冻存用培养基组合物，其表现出优异的细胞复苏率(cellrecovery rates)、细胞存活率和解冻后的细胞活性，本发明还涉及包括所述培养基组合物和治疗性细胞的药物组合物。

背景技术

随着动物细胞培养方法的发展，这些方法已广泛应用到包括蛋白质药物生产在内的各个领域的生物学研究。在利用动物细胞生产蛋白质药物时，冻存(cryopreservation)主要用作允许长期维持细胞系特性的保藏方法。

通过冻存可以克服细胞培养和维持中的困难，可以防止细菌、支原体等的污染。此外，可以防止细胞系的转化，还可以保证实验和生产的可重现性。

一般来说，动物细胞在冻存过程中会受到细胞损伤，即，细胞暴露于低温会导致细胞器官受损和细胞功能受损。因此，为了保证冻存后的细胞身份，应进行能维持细胞的特性和存活率的冻存方法的开发和验证。

作为动物细胞冻存的一般方法，将10％的二甲基亚砜(DMSO)添加到补充有用于保护细胞膜的血清的细胞培养基中，将细胞逐渐冷却并储存在-196℃下的液氮中。然而，由于血清的问题，在诸如蛋白质生产等的过程中这种方法的使用频率正在降低。此外，虽然血清中的微量元素给细胞的生长施加了影响，但存在难以分析这些要素的问题，且这些要素可以根据生产时间和地点而变化。

此外，大多数血清是来自动物，即使它来自人类，也会受到病毒等的感染。因此，在使用含血清作为直接治疗药物的组合物(细胞治疗剂)中存在安全问题。

发明内容

技术问题

因此，本发明的发明人建立了冻存用培养基组合物，其允许长期冷冻动物细胞并且其不含血清，因此可用作细胞治疗剂用的组合物，且本发明的发明人已完成了本发明。

因此，本发明的一个目的是提供细胞冻存用培养基组合物。

本发明的另一个目的是提供一种药物组合物，其包括上述细胞冻存用培养基组合物。

解决问题的技术方案

根据本发明的一个目的，本发明提供了一种细胞冻存用培养基组合物，基于所述培养基组合物的总体积，所述培养基组合物包括15-55v/v％的白蛋白、20-30v/v％的葡聚糖、2-8v/v％的二甲基亚砜和15-55v/v％的细胞培养基。

根据本发明的另一个目的，本发明提供了一种预防或治疗癌症或感染性疾病的药物组合物，所述药物组合物包括本发明的培养基组合物和作为活性成分的免疫细胞。

根据本发明的又一个目的，本发明提供了一种预防或治疗退行性疾病(degenerative disorder)和免疫相关紊乱的药物组合物，所述药物组合物包括本发明的培养基组合物和作为活性成分的干细胞。

本发明的有益效果

如果细胞是冷冻在本发明的细胞冻存用所述培养基组合物中，那么当细胞被解冻时，细胞的存活率很高，并且还维持了细胞的活性。此外，本发明的所述培养基组合物允许冻存的治疗性细胞施用给受试对象而无需诸如洗涤、分离等的额外步骤。因此，所述培养基组合物可以作为用于细胞冻存的优良培养基组合物或者作为良好的治疗性组合物。

附图说明

图1a-1d显示了NK细胞在解冻和用IL-2培养后的复苏率(图1a和1c)和存活率(图1b和1d)，其中NK细胞被冷冻在根据本发明一实施方式制备的细胞冻存用培养基组合物中。