[发明专利]用于选择素靶向的重组嵌合蛋白

权利要求书

1.一种重组嵌合P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)蛋白，其至少包含：选择素结合结构域，其包含SEQ ID NO:11(成熟PSGL-1序列)的至少aa 5-16，亮氨酸拉链结构域，其包含与SEQ ID NO:12(神经视网膜特异性亮氨酸拉链)的aa187-208具有至少90％同源性或同一性的氨基酸序列，和二硫键促进区。

2.根据权利要求1所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述选择素结合结构域包含SEQID NO:11(PSGL-1序列)的至少aa 1-47。

3.根据权利要求1所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述亮氨酸拉链包含与SEQ IDNO:12的aa 181-215具有至少90％同源性或同一性的氨基酸序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述二硫键促进区包含由以下通式定义的氨基酸序列：

(X₁)n-C(X₂)m-(X₃)

其中：

-X₁、X₂代表除半胱氨酸(Cys)外的任意氨基酸或氨基酸序列，

-C为Cys，

-X₃为任意氨基酸，以及

-n、m为由1-6组成的整数。

5.根据权利要求4所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中：

-X₁优选包含脯氨酸、组氨酸或苏氨酸；

-n最多为5；以及

-X₂包含至少一个脯氨酸。

6.根据权利要求5所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中：

-X₂为Pro-Pro；

-X₃包含半胱氨酸和至少一个脯氨酸。

7.根据权利要求6所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述二硫键促进区为IgG1铰链区(SEQ ID NO:20)。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其还包含聚甘氨酸间隔子，所述聚甘氨酸间隔子至少包含赖氨酸(Lys或K)或半胱氨酸(Cys或C)。

9.根据权利要求8所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述间隔子是SEQ ID NO:17。

10.一种二聚体蛋白，其包含通过至少一个二硫键彼此共价连接的两个根据权利要求1-9中任一项的重组嵌合PSGL-1蛋白。

11.根据权利要求10所述的二聚体蛋白质，其为同二聚体。

12.根据权利要求1-9中任一项所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其还包含适于分泌并且在分泌前被切除的信号肽序列。

13.根据权利要求14的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述信号肽选自：SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:21-34。

14.根据权利要求12-13中任一项所述的重组嵌合PSGL-1蛋白，其中所述信号肽是小鼠IgH信号肽(SEQINO:18)。

15.一种编码权利要求1-9和12-14中任一项所述的重组嵌合蛋白的DNA序列，其包含：选择素结合结构域，其包含SEQ ID NO:11(成熟PSGL-1序列)的至少aa 5-16，亮氨酸拉链结构域，其包含与SEQ ID NO:12(神经视网膜特异性亮氨酸拉链)的aa 187-208具有至少90％同源性或同一性的氨基酸序列，和二硫键促进区。