[发明专利]核酸样品的制备方法

说明书

本发明提供了一种以微创方式从被检测体采集核酸样品的方法。本发明提供制备来自被检测体的皮肤细胞的核酸的方法，包括从被检测体采集的皮肤表层脂质中分离核酸的步骤。

技术领域

本发明涉及核酸样品的制备方法。

背景技术

近些年，伴随着分析技术的迅猛发展，已经能够对各种各样生物体样品中的分子(核酸、蛋白质、代谢物等)进行详细分析。而且，利用这些分子分析对人体内现在、甚至将来的生理状态进行调查的技术也在发展当中。其中，对于使用核酸分子进行的分析，已经建立了全面的分析方法，具有如下优点：通过一次分析就能获得丰富信息，而且基于许多单核苷酸多态性或RNA功能的研究报告能够很容易对分析结果建立功能性的联系。

全世界的许多研究机构都在开发使用以微创方式或非侵入的方式采集的生物体样品中的核酸分子进行如疾病等的诊断和预测的技术，该技术在应用化方面取得了飞速的进展。其中，常用的是使用DNA或RNA的诊断技术。使用DNA的诊断技术是通常采集唾液或口腔内的细胞，对其中包含的基因组DNA的单核苷酸多态性进行分析，由此对将来的疾病风险或自身的体质进行诊断的方法。另一方面，使用RNA的诊断技术是根据血液、尿等生物体样品中含有的RNA表达情况，对现在生物体内疾病的有无进行诊断的方法(非专利文献1)。

生物体的各种各样的组织中，因为皮肤是与外界接触的组织，所以皮肤作为一种能够以微创性的方式采集的生物体样品组织引起了人们的注意。现有技术中，作为从皮肤以非侵入的方式或微创方式采集核酸的方法，报道有使用胶带剥离角质层或拔出的毛发的方法(非专利文献2、专利文献1)。然而，通过剥离角质层采集核酸的缺点是：必须要使用专用的胶带；采集量为微量；以及，从采集的核酸只能获得来自表皮的表达信息等。此外，从拔出的毛发采集核酸的缺点是：拔毛时伴有疼痛；以及，从采集的核酸只能获得来自毛囊的表达信息等。此外，作为以非侵入的方式从皮肤采集核酸的方法，还有如下方法：使用湿润的药棉拭子(棉球)在皮肤表面擦拭以采集人皮肤样本，然后进行RNA特征分析(非专利文献3)。对于该报道中采集的人皮肤样本而言，从其采集方法来看，不存在皮肤表面上的脂质。

(专利文献1)特开第2005-192409号

(非专利文献1)《临床检验科学评论》(Crit Rev Clin Lab Sci),2014,51,200-231

(非专利文献2)《皮肤病学研究期刊》(J Invest Dermatol),2006,126,2234-2241

(非专利文献3)《国际法医学:遗传学》(Forensic Sci Int Genet)，2012,6(5):565-577

发明内容

一方面，本发明提供一种制备来自被检测体的皮肤细胞的核酸的方法，其中，包括从被检测体采集的皮肤表层脂质中分离核酸的步骤。

另一方面，本发明提供一种核酸的分析方法，其中，包括对通过上述方法制备的核酸进行分析的步骤。

另一方面，本发明提供一种制备来自被检测体的皮肤细胞的核酸的试剂盒，其中，包括被检测体的皮肤表层脂质的采集工具。

附图说明

[图1]各种生物体样品中包含的RNA。

[图2]来自各种生物体样品的RNA中mRNA的表达。

[图3]SSL中表皮、汗腺、毛囊、真皮和皮脂腺的标志物基因的表达量。

[图4]下一代测序仪和实时PCR的表达量结果的相关性分析。

具体实施方式

本领域中希望开发一种不用考虑采集者或场所，并且能够以微创性的方式从被检测体采集核酸样品的方法。而且希望从得到的核酸样品能够获得来皮肤和其他各种各样的组织或器官的信息。