[发明专利]靶向表皮生长因子受体变体III的嵌合抗原受体

权利要求书

1.表皮生长因子受体变体III(EGFRvIII)特异性嵌合抗原受体(CAR)，其包含胞外配体结合结构域、第一跨膜结构域和胞内信号传导结构域，其中胞外配体结合结构域包含单链Fv片段(scFv)，所述scFv包含：重链可变(VH)区和轻链可变(VL)区，所述VH区包含来自包含SEQ ID NO：5、9、11、13、15、37、39、41、43或48中所示的序列的VH区的3个CDR，所述VL区包含来自包含SEQ ID NO：6、10、12、14、16、38、40、42或49中所示的序列的VL区的3个CDR。

2.权利要求1的EGFRvIII特异性CAR，其中VH区包含SEQ ID NO：5、9、11、13、15、37、39、41、43、48中所示的序列或其具有非CDR内的残基中的一个或几个保守氨基酸取代的变体；和/或VL区包含SEQ ID NO：6、10、12、14、16、38、40、42、49中所示的氨基酸序列或其具有非CDR内的氨基酸中的一个或几个氨基酸取代的变体。

3.权利要求1或2的EGFRvIII特异性CAR，其中胞内信号传导结构域包含CD3ζ信号传导结构域。

4.权利要求1或2的EGFRvIII特异性CAR，其中胞内信号传导结构域包含4-1BB信号传导结构域。

5.权利要求1-4任一项的EGFRvIII特异性CAR，其中胞内信号传导结构域是第一胞内信号传导结构域，且CAR还包含第二胞内信号传导结构域。

6.权利要求5的EGFRvIII特异性CAR，其中第一胞内信号传导结构域包含CD3ζ信号传导结构域，且第二胞内信号传导结构域包含4-1BB信号传导结构域。

7.权利要求1-6任一项的EGFRvIII特异性CAR，还包含胞外配体结合结构域与第一跨膜结构域之间的柄结构域。

8.权利要求7的EGFRvIII特异性CAR，其中柄结构域选自：人CD8α铰链、人CD28铰链、IgG1铰链和FcγRIIIα铰链。

9.权利要求1-8任一项的EGFRvIII特异性CAR，其中第一跨膜结构域包含CD8α链跨膜结构域。

10.权利要求1-9任一项的EGFRvIII特异性CAR，还包含第二胞外配体结合结构域，其中第二胞外配体结合结构域对EGFRvIII无特异性。

11.权利要求1-10任一项的EGFRvIII特异性CAR，其中胞外配体结合结构域、第一跨膜结构域和胞内信号传导结构域位于单一多肽上。

12.权利要求1-6任一项的EGFRvIII特异性CAR，还包含第二跨膜结构域，其中第一跨膜结构域和胞外配体结合结构域位于第一多肽上，且其中第二跨膜结构域和胞内信号传导结构域位于第二多肽上，其中第一跨膜结构域包含来自高亲和力IgE受体(FcεRI)的α链的跨膜结构域，且第二跨膜结构域包含来自FcεRI的γ或β链的跨膜结构域。

13.权利要求12的EGFRvIII特异性CAR，还包含第三多肽，其包含与来自共刺激分子的胞内信号传导结构域融合的第三跨膜结构域，其中第三跨膜结构域包含来自FcεRI的γ或β链的跨膜结构域。

14.多核苷酸，其包含编码权利要求1-13任一项的EGFRvIII特异性CAR的核酸序列。

15.表达载体，其包含权利要求14的多核苷酸。

16.改造的免疫细胞，其在其细胞表面膜上表达权利要求1-13任一项的EGFRvIII特异性CAR。