[发明专利]使用烟曲霉三肽基肽酶生产蛋白水解产物的方法

权利要求书

1.一种用于生产水解产物的方法，所述方法包括：

a)将至少一种蛋白质或其一部分与三肽基肽酶混合，所述三肽基肽酶：

i)包含氨基酸序列SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或其功能片段；

ii)包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4具有至少70％同一性的氨基酸；

iii)由包含序列SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列编码；

iv)由与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少约70％同一性的核苷酸序列编码；

v)由在中严格条件下与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2杂交的核苷酸序列编码；或

vi)由归因于遗传密码的简并性而不同于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列编码；

b)在45℃与70℃之间的温度下孵育，以及

c)回收所述水解产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述孵育温度在50℃与65℃之间。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述孵育温度在55℃与65℃之间。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将所述回收的水解产物与至少一种饲料或食品成分混合。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中将所述蛋白质或其部分进一步用内切蛋白酶进行处理。

6.根据权利要求5所述的方法，其中同时添加所述内切蛋白酶和所述三肽基肽酶。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中顺序地添加所述内切蛋白酶和所述三肽基肽酶，例如，在所述内切蛋白酶之后添加所述三肽基肽酶。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的方法，其中所述内切蛋白酶和三肽基肽酶在相似的pH范围有活性。

9.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其中所述内切蛋白酶是酸性内切蛋白酶。

10.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其中所述内切蛋白酶是碱性内切蛋白酶，优选地选自胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及其组合。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述水解产物在倾向于对所述至少一种蛋白质或其部分具有免疫反应的受试者中具有降低的免疫原性。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述至少一种蛋白质是动物蛋白质或植物蛋白质，优选地其中所述蛋白质是以下中的一种或多种：麦醇溶蛋白，β-酪蛋白，β-乳球蛋白，或麦醇溶蛋白、β-酪蛋白、β-乳球蛋白的免疫原性片段，乳清蛋白，鱼蛋白，肉蛋白，卵蛋白，大豆蛋白，大麦醇溶蛋白或谷物蛋白。

13.一种反应体系，所述反应体系包含至少一种蛋白质或其一部分以及三肽基肽酶，所述三肽基肽酶：

a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或其功能片段；

b)包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4具有至少70％同一性的氨基酸；

c)由包含序列SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列编码；

d)由与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少约70％同一性的核苷酸序列编码；

e)由在中严格条件下与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2杂交的核苷酸序列编码；或

f)由归因于遗传密码的简并性而不同于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列编码；

其中将所述反应体系在45℃与70℃之间的温度下维持足够长的时间以允许产生水解产物。