[发明专利]使用过表达编码铁输出蛋白基因的肠杆菌科的细菌生产L-氨基酸的方法有效

专利信息
申请号: 201780013499.1 申请日: 2017-02-24
公开(公告)号: CN109121422B 公开(公告)日: 2021-12-21
发明(设计)人: A.Y.罗姆吉纳;A.N.彻尼肖夫;Y.G.罗斯托娃;E.B.沃罗什洛娃;M.Y.基尔于克欣 申请(专利权)人: 味之素株式会社
主分类号: C12P13/04 分类号: C12P13/04;C12P13/08;C07K14/245
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 张文辉
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 使用 表达 编码 输出 蛋白 基因 杆菌 细菌 生产 氨基酸 方法
【权利要求书】:

1.生产L-氨基酸的方法,所述方法包括:

(i)在培养基中培养肠杆菌科的L-氨基酸生产细菌以在所述培养基或细菌的细胞或所述培养基和细菌的细胞这两者中生产并积累所述L-氨基酸,和

(ii)从所述培养基或细菌的细胞或所述培养基和细菌的细胞这两者中收集所述L-氨基酸,

其中所述细菌已经以过表达编码铁输出蛋白(iron exporter)的基因的方式进行了修饰,

其中所述编码铁输出蛋白的基因选自下组:fetB基因、fetA基因、fieF基因,和它们的组合,和

其中所述L-氨基酸选自下组:L-异亮氨酸、L-赖氨酸、L-甲硫氨酸和L-苏氨酸。

2.根据权利要求1的方法,其中通过增加所述基因的拷贝数,和/或修饰所述基因的表达调控区来过表达所述编码铁输出蛋白的基因,使得所述基因的表达与未修饰细菌相比提高。

3.根据权利要求1或2的方法,其中所述编码铁输出蛋白的基因编码选自下组的蛋白质:

(A)由SEQ ID NO:2、4或6的氨基酸序列组成的蛋白质;和

(B)由相对于SEQ ID NO:2、4或6的完整氨基酸序列具有不少于90%同源性的氨基酸序列组成的蛋白质,其中所述蛋白质具有铁输出蛋白活性。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法,其中所述编码铁输出蛋白的基因是选自下组的DNA:

(A)由SEQ ID NO:1、3或5的核苷酸序列组成的DNA;和

(B)由起因于遗传密码的简并性的SEQ ID NO:1、3或5的变体核苷酸序列组成的DNA。

5.根据权利要求1至4中任一项的方法,其中所述细菌属于埃希氏菌属。

6.根据权利要求5的方法,其中所述细菌是大肠杆菌。

7.根据权利要求1至4中任一项的方法,其中所述细菌属于泛菌属。

8.根据权利要求7的方法,其中所述细菌是菠萝泛菌。

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