[发明专利]用于测定T细胞依赖性双特异性抗体的方法

权利要求书

1.一种用于检测组合物中的T细胞依赖性双特异性抗体(TDB)的方法，其中该双特异性抗体包含靶抗原结合片段和CD3结合片段，该方法包括

使T细胞和靶细胞群体与该组合物接触，其中该T细胞包含可操作连接至响应于T细胞活化的响应元件的编码报告物的核酸，且其中该靶细胞表达该靶抗原；

其中该报告物的表达指示存在TDB。

2.权利要求1的方法，其中该报告物是萤光素酶，荧光蛋白，碱性磷酸酶，β内酰胺酶，或β半乳糖苷酶。

3.权利要求2的方法，其中该萤光素酶是萤火虫萤光素酶，海肾萤光素酶，或纳米萤光素酶。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中该响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子，AP-1启动子，NFκB启动子，FOXO启动子，STAT3启动子，STAT5启动子或IRF启动子。

5.权利要求4的方法，其中该响应于T细胞活化的响应元件包含来自NFAT，AP-1，NFκB，FOXO，STAT3，STAT5和IRF中任一项或多项的T细胞活化响应性元件。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中该T细胞群体是CD4⁺T细胞或CD8⁺T细胞群体。

7.权利要求1-5中任一项的方法，其中该T细胞群体是Jurkat T细胞或CTLL-2T细胞群体。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中该靶抗原在该靶细胞的表面上表达。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中该靶抗原是CD4，CD8，CD18，CD19，CD11a，CD11b，CD20，CD22，CD34，CD40，CD79α(CD79a)，CD79β(CD79b)，EGF受体，HER2受体，HER3受体，HER4受体，FcRH5，CLL1，LFA-1，Mac1，p150，95，VLA-4，ICAM-1，VCAM，αv/β3整联蛋白，VEGF，flk2/flt3受体；肥胖(OB)受体；mpl受体；CTLA-4；蛋白C，BR3，c-met，组织因子，β7，Tenb2，STEAP，或跨膜肿瘤相关抗原(TAA)。

10.权利要求1-9中任一项的方法，其中

a)该靶抗原是HER2受体且该靶细胞是BT-474细胞，

b)该靶抗原是HER2受体且该靶细胞是SKBR3细胞，

c)该靶抗原是CD20且该靶细胞是Wil2-S细胞，或

d)该靶抗原是CD79b且该靶细胞是BJAB细胞。

11.权利要求1-10中任一项的方法，其中该细胞群体中T细胞对靶细胞的比是约1:1，约1:2，约1:3，约1:4，约1:5，约1:6，约1:7，约1:8，约1:9或约1:10。

12.权利要求1-11中任一项的方法，其中该细胞群体中T细胞对靶细胞的比是约1:4。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中该细胞群体范围为约1×10³至约1×10⁶。

14.权利要求1-12中任一项的方法，其中该细胞群体是约1×10⁴至约5×10⁴。

15.权利要求1-14中任一项的方法，其中T细胞群体与以范围为0.01ng/mL至50ng/mL的浓度包含该TDB的组合物接触。