[发明专利]培养生成液制造方法在审
申请号: | 201780015560.6 | 申请日: | 2017-03-09 |
公开(公告)号: | CN108699516A | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 阿勒库协·古拉德克夫 | 申请(专利权)人: | 金太郎细胞力量株式会社 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/0775;C12M1/00 |
代理公司: | 北京汇智英财专利代理事务所(普通合伙) 11301 | 代理人: | 郑玉洁 |
地址: | 日本东京都品川区*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 培养容器 生成液 骨髓液 中间层 培养液 代谢产物 制造 多层 分泌 萃取 干细胞生长 | ||
1.一种培养生成液的制造方法,使用收集自一捐赠者的一骨髓液所制得的一干细胞,该方法包含:
一个分离骨髓液步骤,将收集自一个捐赠者的一个骨髓液分离为多层;
一个萃取骨髓液步骤,自于该分离骨髓液步骤中分离为多层的骨髓液中的中间层萃取一个中间层骨髓液;
一个第一固定干细胞步骤,将自该萃取骨髓液步骤中萃取得的该中间层骨髓液及一个预定培养液注入一个第一培养容器,该第一培养容器具有一个预定容量,该第一培养容器的一个底表面具有一个预定面积,将该第一培养容器静置一个预定时间,使该中间层骨髓液中的一个第一干细胞固定于该第一培养容器的一个底表面;
一个第一培养干细胞步骤,于该第一固定干细胞步骤中将该第一干细胞固定于该第一培养容器的底表面后,流出该第一培养容器中的培养液,并将一个新的培养液注入该第一培养容器,将该第一培养容器静置一个预定时间,培养该第一干细胞直到该第一干细胞的总表面积达到相对该第一培养容器的底表面积的一个第一目标比;
一个第一收集干细胞步骤,于该第一培养干细胞步骤中该第一干细胞的总表面积达该第一目标比时,自该第一培养容器收集该第一干细胞;
一个分离干细胞步骤,将自该第一收集干细胞步骤中收集的第一干细胞离心分离为多层;
一个第二收集干细胞步骤,收集于该分离干细胞步骤中分离为多层的第一干细胞中位于最底层的一个第二干细胞;
一个第二固定干细胞步骤,将收集自该第二收集干细胞步骤的第二干细胞及一个预定培养液注入一个第二培养容器,该第二培养容器具有大于该第一培养容器的容量,及大于该第一培养容器的底表面的底表面积,将该第二培养容器静置一个预定时间,使该第二干细胞固定于该第二培养容器的一个底表面;
一个第二培养干细胞步骤,于该第二固定干细胞步骤将该第二干细胞固定于该第二培养容器的底表面后,流出该第二培养容器中的培养液,并将一个新的培养液注入该第二培养容器,将该第二培养容器静置一个预定时间,培养该第二干细胞直到该第二干细胞的总表面积达到相对该第二培养容器的底表面积的一个第二目标比;及
一个第一萃取培养生成液步骤,于该第二培养干细胞步骤中该第二干细胞的总表面积达到该第二目标比时,自该第二培养容器萃取一个培养生成液,该培养生成液包含分泌自该单一种类的增生的第二干细胞的一个预定代谢产物。
2.如权利要求1所述的培养生成液的制造方法,其中,于该第一固定干细胞步骤及该第一培养干细胞步骤中,该第一培养容器以一个预定倾斜角度静置一预定时间,且于该第二固定干细胞步骤及该第二培养干细胞步骤中,该第二培养容器以一个预定倾斜角度静置一个预定时间。
3.如权利要求1或2所述的培养生成液的制造方法,包含:
一个第二收集干细胞步骤,于该第一萃取培养生成液步骤中自该第二培养容器萃取一个培养生成液后,自该第二培养容器收集该第二干细胞;
一个第三固定干细胞步骤,将自该第二收集干细胞步骤中收集的第二干细胞及一个新的培养液注入一个第三培养容器,该第三培养容器具有一个预定容量,该第三培养容器的一个底表面具有一个预定面积,该容量及该底表面积大于该第二培养容器,将该第三培养容器静置一个预定时间,使该第二干细胞固定于该第三培养容器的一个底表面;
一个第三培养干细胞步骤,于该第三固定干细胞步骤中将该第二干细胞固定于该第三培养容器的底表面后,流出该第三培养容器中的培养液,并将一个新的培养液注入该第三培养容器,将该第三培养容器静置一个预定时间,培养该第二干细胞直到该第二干细胞的总表面积达到该第三培养容器的底表面积的一个第三目标比;及
一个第二萃取培养生成液步骤,于该第三培养干细胞步骤中该第二干细胞的总表面积达到该第三目标比时,自该第三培养容器萃取一个培养生成液,该培养生成液包含分泌自该单一种类的增生的第二干细胞的一个预定代谢产物。
4.如权利要求3所述的培养生成液的制造方法,其中,于该第三固定干细胞步骤及该第三培养干细胞步骤中,该第三培养容器以一个预定倾斜角度静置一预定时间。
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