[发明专利]用于高分辨率地局部成像样品中的结构的方法

权利要求书

1.一种用于高分辨率地成像样品(8)中的借助冷光标记物(56，57)标记的结构的方法，

其中，使对所述冷光标记物(56，57)发射冷光产生影响的光对准所述样品(8)，所述光具有如下强度分布：所述强度分布具有与强度最大值(3)相邻的零点(4)，

其中，以所述零点(4)扫描所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)，

其中，记录从所述零点(4)的区域发射的冷光，并且将所述冷光配属于所述零点(4)在所述样品(8)中的位置，

其特征在于，

将令人感兴趣的对象(55)的多个样本分别与所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)中的一个重叠地布置，

使所述令人感兴趣的对象(55)的多个样本承受变化的周围环境条件，以便检测所述令人感兴趣的对象(55)对所述变化的周围环境条件作出的反应，其中，在所述周围环境条件改变期间和/或在所述周围环境条件改变之前以及在所述周围环境条件改变之后，以相应的零点(4)扫描所述样品(8)的各个部分区域，并且

在至少一个方向上限制所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)的尺寸，使得所述尺寸不大于所述强度最大值(3)在所述方向上的间距的75％，其中，在所述至少一个方向上，所述强度最大值(3)与所述零点(4)在所述样品中相邻，

所述对所述冷光标记物(56，57)发射冷光产生影响的光是冷光使能光或者冷光阻抑光，所述冷光阻抑光阻抑所述零点(4)以外的冷光标记物(56，57)发射冷光，

在以所述零点(4)扫描所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)之前，附加地使具有如此强度分布的关断光(34)对准所述样品(8)，使得所述关断光将所述样品(8)的与待扫描的部分区域(7)邻接的部分区域(39)中的、构造成可切换的冷光标记物关断到非激活状态中，其中，所述邻接的部分区域(39)在至少一个方向上与所述待扫描的部分区域(7)邻接，在所述至少一个方向上，所述强度最大值(3)与所述零点(4)在所述样品中相邻。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，使所述样品(8)中的令人感兴趣的对象(55)的多个样本的不同子集承受不同的变化的周围环境条件。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，通过添加化学物质来改变所述周围环境条件。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，将所述令人感兴趣的对象(55)的多个样本布置成相对于所述样品(8)的固定点(50)定义的图案(51)，并且以所述零点(4)相对于所述样品(8)的固定点(50)接近所述样品(8)的待扫描的部分区域。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，以所述零点(4)重复扫描所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，至少在重复扫描所述样品(8)的待扫描的部分区域时，将所述零点(4)布置在每个待扫描的部分区域(7)的不超过3n个位置处，其中，n是如下空间方向的数量：在所述空间方向上，扫描所述样品(8)的待扫描的部分区域。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，以多个样本布置在所述样品(8)中的对象(55)从如下组中选择：所述组包括分子、蛋白质、复合物、突触、膜、细胞组织和病毒。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)的尺寸在至少一个方向上不大于所述强度最大值(3)在所述方向上的间距的50％，在所述至少一个方向上，所述强度最大值(3) 与所述零点(4)在所述样品中相邻。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述样品(8)的待扫描的部分区域(7)的尺寸在所述至少一个方向上不大于如下距离，在所述至少一个方向上，所述强度最大值(3)与所述零点(4)在所述样品中相邻，在所述距离上，所述光的强度从所述零点(4)出发在所述方向上增大到所述光在相邻的强度最大值(3)中的强度的50％。