[发明专利]重组酶突变在审
申请号: | 201780016589.6 | 申请日: | 2017-03-28 |
公开(公告)号: | CN108779445A | 公开(公告)日: | 2018-11-09 |
发明(设计)人: | M.W.凯林格 | 申请(专利权)人: | 亿明达股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张晓飞 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组酶 流动池表面 核酸扩增 试剂盒 图案化 衔接头 单链 介导 扩增 文库 突变 | ||
1.重组UvsX重组酶,其包含与SEQ ID NO:1至少60%,70%,80%,90%,95%或99%相同的氨基酸序列,该重组UvsX包含与RB49UvsX氨基酸序列中Pro321和Asp334功能等同的位置处的至少一个氨基酸取代突变。
2.权利要求1的重组UvsX重组酶,其中所述至少一个取代突变包含突变为带电荷的残基。
3.权利要求1或2的重组UvsX重组酶,其中所述至少一个取代突变包含突变为碱性残基。
4.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其中所述至少一个取代突变包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的Pro321Lys同源的突变。
5.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其中所述至少一个取代突变包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的Asp334Lys同源的突变。
6.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其中所述至少一个取代突变包含与RB49UvsX氨基酸序列中的Pro321Lys和Asp334Lys同源的突变。
7.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其进一步包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的Pro256功能等同的位置处的取代突变。
8.权利要求7的重组UvsX重组酶,其包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的Pro256Lys同源的取代突变。
9.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其进一步包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的His63功能等同的位置处的取代突变。
10.权利要求9的重组UvsX重组酶,其包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中的His63Ser同源的取代突变。
11.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其进一步包含选自下组的突变:在C末端添加一个或多个谷氨酸残基,在所述C末端添加一个或多个天冬氨酸残基及其组合。
12.前述权利要求中任一项的重组UvsX重组酶,其源自选自下组的肌病毒科噬菌体:T4,T6,Rb69,Aeh1,KVP40,不动杆菌噬菌体(Acinetobacter phage)133,气单胞菌噬菌体(Aeromonas phage)65,噬蓝藻体(cyanophage)P-SSM2,噬蓝藻体PSSM4,噬蓝藻体S-PM2,Rb32,弧菌噬菌体(Vibrio phage)nt-1,Rb16,Rb43和Rb49。
13.重组UvsX重组酶,其包含对半保守域的取代突变,所述半保守域包含SEQ ID NO:3-4中任一个的氨基酸序列,其中所述取代突变包含选自第4位取代为除Phe或Asp以外的任何残基的突变,或所述半保守域包含SEQ ID NO:5-6中的任一个的氨基酸序列,其中所述取代突变包含选自第4位取代为除Arg或Asp以外的任何残基的突变。
14.权利要求13的重组UvsX重组酶,其中所述突变包括突变为带电荷的残基。
15.权利要求13或14的重组UvsX重组酶,其中所述突变包含在第4位取代为Lys。
16.重组UvsX重组酶,其包含SEQ ID NO:2和22-35中任一个的氨基酸序列。
17.权利要求16的重组UvsX重组酶,其进一步包含与所述RB49UvsX氨基酸序列中Pro256功能等同的位置处的取代突变。
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