[发明专利]电化学发光检测中的支链胺

说明书

本发明涉及使用新的试剂组合物通过电化学发光来检测样品中的分析物的方法。公开了新的试剂组合物、用于测量电化学发光(ECL)的试剂盒以及使用所述新的试剂组合物的电化学发光检测方法。具体而言，本发明涉及可用于所述测量以提供改进的测定性能的新型化合物组合的用途。

发明领域

本发明涉及使用新试剂组合物通过电化学发光来检测样品中的分析物的方法。公开了新试剂组合物、用于测量电化学发光(ECL)的试剂盒和使用所述新试剂组合物的电化学发光检测方法。具体而言，本发明涉及可用于所述测量以提供改进的测定性能的新型化合物组合的用途。

背景和现有技术

用于测量电化学发光现象的方法已知道一些年。此类方法利用特定金属配合物借助氧化和还原反应实现激发状的能力，所述特定金属配合物从该激发态衰变到基态，发射光子。对于综述，参见Richter, M.M., Chem. Rev. 104 (2004) 3003-3036。

此时，存在许多利用电化学发光(ECL)用于分析测量(例如，在体外诊断应用的领域中)的可商购仪器。可诱导发射ECL的物质(ECL-活性物质)已经用作ECL标记物。ECL标记物的实例包括有机金属化合物，诸如三-联吡啶-钌(RuBpy)部分，其中所述金属来自例如第VII和VIII族的金属，包括Re、Ru、Ir和Os。在ECL过程中与ECL标记物反应的物质在本文中称为ECL共反应剂。用于ECL的常用共反应剂包括叔胺(例如三丙胺(TPA))、草酸盐和过硫酸盐。光由ECL标记物或ECL配体生成；结合试剂在结合相互作用中的参与可通过测量从ECL标记物发射的ECL来监测。或者，来自ECL-活性化合物的ECL信号可指示化学环境(参见例如，美国专利号5,641,623和5,643,713，其描述了监测特定ECL共反应剂的存在或破坏的ECL测定)。对于ECL、ECL标记物、ECL测定和用于进行ECL测定的仪器的更多背景，参见美国专利号5,093,268；5,147,806；5,240,863；5,308,754；5,324,457；5,591,581；5,597,910；5,679,519；5,705,402；5,731,147；5,786,141；5,846,485；5,866,434；6,066,448；6,136,268和6,207,369以及EP 0 441 875和公开的PCT号WO90/05296；WO97/36931；WO98/12539；WO99/14599；WO99/32662；WO99/58962；WO99/63347；WO00/03233和WO98/57154。

可商购的用于体外诊断的ECL仪器已经表明优异的性能。它们由于包括其优异的灵敏度、动态范围、精度和对复杂样品基质的耐受性的原因已经变得广泛应用。可商购的仪器使用基于流动室的设计，所述设计具有持久可重复使用的流动室。

用于测定分析物的可用样品体积经常受到限制，并且越来越多的不同分析物必须从一个样品中测定出。还要求开发用于测定自动化的更快速的实验室设备和用于检测分析物的更灵敏的方法。这导致需要高度灵敏和特异性的电化学发光测定和用于进行它们的方法。此外，还应考虑与安全危害或者环境问题相关的改进。

具体而言，分析物的更灵敏的检测仍然是非常有利的。因此，本发明的目标是改进所述已知的方法和试剂组合物，尤其是关于ECL信号的增强和改进的与电化学发光程序组合的分析物检测。期望发现具有改进的电化学发光测定性能的新型信号增强试剂和/或化合物。

发明概述

在一个实施方案中，本发明涉及检测电化学发光(ECL)信号的方法，其包括

a)使反应组合物与电极接触，所述反应组合物包含

i)至少一种支链叔胺，和

ii)包含过渡金属配合物的ECL化合物，

b)电化学触发发光的释放，和

c)检测ECL信号。