[发明专利]用于癌症治疗的工程化TRAIL

权利要求书

1.一种Fc-TRAIL融合多肽的单突变体多肽链，其包含通过至少一个Fc间二硫键二聚化的两条多肽链，

所述突变体链包含与一组三个人TRAIL单体部分结合以形成单个无支链多肽的人IgGFc部分，所述单个无支链多肽在氨基末端至羧基末端顺序上包含Fc部分、TRAIL-Fc接头、第一TRAIL单体、TRAIL单体间接头、第二TRAIL单体、第二TRAIL单体间接头和第三TRAIL单体，

其中，所述每个接头由15-20个氨基酸组成，并且所述两个TRAIL单体间接头中的每一个包含3个G₄S结构域，并且

其中，所述三个TRAIL单体中的至少两个包含在天然野生型人TRAIL中没有发现的至少一个稳定化突变，并且

其中，通过两个拷贝的所述突变体多肽链的二聚化形成的所述Fc-TRAIL融合多肽表现出大于或等于65℃的解链温度。

2.根据权利要求1所述的多肽链，其中，所述至少一个稳定化突变的位置对应于野生型TRAIL(SEQ ID NO：28)的位置247，并且是位于野生型TRAIL的该位置的除异亮氨酸以外的氨基酸。

3.根据权利要求2所述的多肽链，其中，所述除异亮氨酸以外的氨基酸是甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸或亮氨酸。

4.根据权利要求2所述的多肽链，其中，所述除异亮氨酸以外的氨基酸是缬氨酸(I247V)。

5.根据权利要求1所述的多肽链，其中，所述至少一个稳定化突变选自R121I、R130G、Y213W、S215D、N228S和I247V。

6.根据权利要求1所述的多肽链，其中，所述至少一个稳定化突变包含选自以下六个组合的至少两个稳定化突变的组合：

1)R121I和I247V；

2)N228S和I247V；

3)R130G和I247V；

4)R121I、R130G、Y213W、S215D和I247V；

5)R130G、Y213W、S215D和I247V；以及

6)R130G、Y213W、S215D、N228S和I247V。

7.一种TRAIL融合多肽的单突变体多肽链，

所述突变体链包含与一组三个人TRAIL单体部分结合以形成单个无支链多肽的人血清白蛋白部分，所述单个无支链多肽在氨基末端至羧基末端顺序上包含Fc部分、TRAIL-Fc接头、第一TRAIL单体、TRAIL单体间接头、第二TRAIL单体、第二TRAIL单体间接头和第三TRAIL单体，

其中，所述每个接头由15-20个氨基酸组成，并且所述两个TRAIL单体间接头中的每一个包含3个G₄S结构域，和

其中，所述三个TRAIL单体中的至少两个包含在天然野生型人TRAIL中没有发现的至少一个稳定化突变，并且

其中，通过两个拷贝的所述突变体多肽链的二聚化形成的所述Fc-TRAIL融合多肽表现出大于或等于65℃的解链温度。

8.根据权利要求7所述的多肽链，其中，所述至少一个稳定化突变的位置对应于野生型TRAIL(SEQ ID NO：28)的位置247，并且是位于野生型TRAIL的该位置的除异亮氨酸以外的氨基酸。

9.根据权利要求8所述的多肽链，其中，所述除异亮氨酸以外的氨基酸是甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸或亮氨酸。

10.根据权利要求8所述的多肽链，其中，所述除异亮氨酸以外的氨基酸是缬氨酸(I247V)。

11.根据权利要求7所述的多肽链，其中，所述至少一个稳定化突变选自R121I、R130G、Y213W、S215D、N228S和I247V。