[发明专利]工程化肠道共生细菌在其外膜囊泡(OMV)中表达异源蛋白质以递送至胃肠道

权利要求书

1.重组革兰氏阴性共生肠道细菌，其来自拟杆菌属，包含用于在外膜囊泡(OMV)中表达异源肽或蛋白质的表达系统，其中所述表达系统是诱导型基因表达系统，包含：

-α-1,2-甘露糖苷酶基因的甘露聚糖诱导型启动子区域，所述启动子区域来自拟杆菌属；

-至少一个核糖体结合位点；

-多克隆位点；和

-转录终止子。

2.权利要求1的重组革兰氏阴性共生肠道细菌，其中所述异源肽或蛋白质是治疗性肽、治疗性蛋白质或抗原。

3.权利要求1或2的重组革兰氏阴性共生肠道细菌，其中所述异源肽或蛋白质与OMV分泌蛋白质的N端信号肽融合。

4.权利要求1或2的重组革兰氏阴性共生肠道细菌，其中所述OMV分泌蛋白质是多形拟杆菌OmpA。

5.一种制备含有异源肽或蛋白质的外膜囊泡(OMV)的方法，包括产生表达异源肽或蛋白质的权利要求1至4任一项的重组革兰氏阴性共生肠道细菌，在导致所述异源肽或蛋白质表达和产生OMV的条件下培养所述细菌，并分离由此含有所述异源肽或蛋白质的OMV。

6.权利要求5的方法，其中诱导所述异源肽或蛋白质的表达被延迟直到OMV产生。

7.权利要求5或6的方法，其中使用不同浓度的诱导组合物来调节所述异源肽或蛋白质的表达。

8.权利要求7的方法，其中所述诱导组合物是甘露聚糖。

9.一种OMV，得自权利要求1至4中任一项的细菌或权利要求5至8中任一项的方法。

10.权利要求9的OMV，用作药物。

11.权利要求10的OMV，用于治疗炎症性肠道疾病。

12.权利要求9的OMV，用作疫苗。

13.一种药物组合物，其包含从权利要求1至4中任一项的重组革兰氏阴性肠道细菌分离的OMV，根据权利要求5至8中任一项的方法制备的OMV，或根据权利要求9至12中任一项的OMV。

14.权利要求13的药物组合物，其进一步包含药学上可接受的赋形剂。

15.权利要求13或14的药物组合物，其进一步包含佐剂。

16.前述权利要求中任一项的重组革兰氏阴性共生肠道细菌、OMV或药物组合物，其中所述重组革兰氏阴性共生肠道细菌是多形拟杆菌。

17.前述权利要求中任一项的方法，其中所述重组革兰氏阴性共生肠道细菌是多形拟杆菌。

18.前述权利要求中任一项的重组革兰氏阴性共生肠道细菌、OMV或药物组合物，其中所述异源肽或蛋白质是衍生自沙门氏菌属、弯曲杆菌属或诺如病毒的抗原。

19.前述权利要求中任一项的方法，其中所述异源肽或蛋白质是衍生自沙门氏菌属、弯曲杆菌属或诺如病毒的抗原。

20.权利要求18的重组革兰氏阴性共生肠道细菌、OMV或药物组合物，其中所述诺如病毒的抗原是诺如病毒衣壳蛋白GII-4。

21.权利要求19的方法，其中所述诺如病毒的抗原是诺如病毒衣壳蛋白GII-4。