[发明专利]一种合成利那洛肽的方法

说明书

涉及医药合成领域，公开了一种合成利那洛肽的方法。所述方采用固相一步环化方法制备利那洛肽，利那洛肽线性肽树脂未经裂解直接采用N‑X代琥珀酰亚胺溶液氧化体系进行一步环化得到利那洛肽树脂，树脂经裂解，纯化和冻干得到利那洛肽。所述的N‑X代琥珀酰亚胺为N‑氯代琥珀酰亚胺、N‑溴代琥珀酰亚胺、N‑碘代琥珀酰亚胺、N‑羟基硫代琥珀酰亚胺中的一种。所述方法具有以下优点：1、采用固相环化，首先起到了假稀释效应，避免肽链的重复折叠，能在较高的浓度下进行环化反应，可极大的提高生产效率；其次环化之前线性肽树脂未进行裂解，避免了大量杂质的产生，提高了利那洛肽环化的效率。2、采用N‑X代琥珀酰亚胺进行一步环化，可避免中间体的多步纯化，降低了中间纯化步骤的成分，提高了利那洛肽的总收率。3、采用特定的氨基酸侧链保护基，在环化过程中定位了1对二硫键，减少了错配副产物的生成，提高了利那洛肽的纯度，可极大的提高生产效率，降低生产成本。

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体涉及一种合成利那洛肽的方法。

背景技术

利那洛肽（Linaclotide）为Ironwood公司开发的一种新型GC-C（肠上皮细胞尿苷酸环化酶C）受体激动剂，可激活肠上皮细胞顶端表面的GC-C受体，导致细胞内和细胞外环鸟苷酸增多。其净效应是氯和碳酸氢盐分泌进入肠腔增加，进而导致液体分泌增多以及大便通过加速，用于治疗成人慢传输型便秘和便秘型肠易激综合征（IBS-C）患者。该药物于2012年12月17日首次获批在美国上市，商品名为LINZESS。

利那洛肽由14个氨基酸组成，并且含有3对二硫键，具体结构序列如下：

利那洛肽的结构中二硫键是其发挥药效的主要作用点，不仅如此，在其合成路线中二硫键的合成难度最大，成为整个肽序列合成研究中的关键点。

关于利那洛肽的合成技术，最早见于Miriam等人的文献报道，（“OptimizedFmocSolid-PhaseSynthesisoftheCysteine-RichPeptideLinaclotide”,PeptideScience,2011,Volume96,Issue1,pages69-80）其分别采用了三种不同的策略进行利那洛肽的合成：（1）肽序中全部采用Trt为Cys保护基固相合成线性粗肽，然后在液相中室温一步氧化得到利那洛肽；（2）肽序中采用五种不同半胱氨酸保护基，即采用2StBu、2pMeOBzl、2Trt或2Mmt、2Acm、2Trt或2Acm、2Trt、2pMeOBzl共三种正交保护方式，进行固相合成线性粗肽，然后采用分步环化策略完成二硫键的合成；（3）肽序中采用两种不同半胱氨酸保护基，即采用2个StBu和4个Trt进行固相合成线性粗肽，然后采用分步环化策略完成二硫键的合成。

中国专利CN102875655B公开了一种合成利那洛肽的方法，其采用Mmt保护基保护半胱氨酸侧链，用逐一偶联方式合成在C端偶联有树脂固相载体的利那洛肽树脂，裂解脱除保护基和树脂固相载体得到利那洛肽线性粗肽，最后采用GSH/GSSH氧化体系进行氧化反应，得到利那洛肽粗品。

中国专利CN104231051A公开了一种利那洛肽的制备方法，其采用Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Cys(Mmt)-OH作为反应原料，逐一偶联获得利那洛肽树脂，经裂解反应获得线性利那洛肽，之后采用磷酸盐缓冲体系、DMSO、EDTA进行氧化获得利那洛肽粗品。