[发明专利]细胞检测方法在审

专利信息
申请号: 201780019613.1 申请日: 2017-02-14
公开(公告)号: CN108884486A 公开(公告)日: 2018-11-23
发明(设计)人: 金子泰久 申请(专利权)人: 富士胶片株式会社
主分类号: C12Q1/04 分类号: C12Q1/04;G01N15/14;G01N21/53;G01N21/64;G01N33/48;G01N33/483;G01N33/49
代理公司: 北京三友知识产权代理有限公司 11127 代理人: 庞东成;李洋
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 细胞 细胞检测 目标细胞 摄像工序 流式细胞术 基因分析 试样液体 图像获取 拍摄 开口 分析
【说明书】:

本发明提供一种能够仅对目标细胞有效且高精度地进行基因分析的细胞检测方法。一种细胞检测方法,其具有如下工序:分取工序,通过流式细胞术从试样液体获取来自细胞的第1信息,并根据第1信息,将目标细胞分取到排列有具有开口的孔的容器中;摄像工序,拍摄分取到容器中的细胞;以及确定工序,基于通过摄像工序拍摄到的细胞的图像获取来自细胞的第2信息,并从已分取的细胞中确定要分析的细胞。

技术领域

本发明涉及一种细胞检测方法。

背景技术

已知利用流式细胞术从试样液体分离并回收目标细胞的方法。

例如,专利文献1中记载有如下方法:利用流式细胞仪(流式细胞术中使用的装置)的分选功能,将由于染色体异常而产生的一部分细胞分离而成的微小细胞(小核)分离并回收为主核(亲核)和小核。

以往技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开2000-157298号公报

发明内容

发明要解决的技术课题

在流式细胞术中,通过从细胞获取前方散射光、侧方散射光以及荧光的荧光强度的信息来分选细胞,并针对目标细胞,在具有多个孔的容器中将一个细胞分取到一个孔中。将分取有细胞的容器旋转在PCR(Polymerase Chain Reaction(聚合酶链反应))装置中,扩增DNA(Deoxyribonucleic Acid(脱氧核糖核酸))并进行基因分析。

但是,在流式细胞术中,由于根据荧光强度的信息而分选目标细胞,因此存在由于染色的非特异性而导致错误分选的情况。并且,还存在两个以上的细胞分取到一个孔中的情况。

还认为当对包含上述问题的容器扩增DNA并进行基因分析时,效率不高,并且也会影响基因分析的精度。

本发明是鉴于这种情况而完成的,其目的在于提供一种能够仅对目标细胞有效且高精度地进行基因分析的细胞检测方法。

用于解决技术课题的手段

根据本发明的一种方式,细胞检测方法具有如下工序:分取工序,通过流式细胞术获取来自试样液体的细胞的第1信息,并根据第1信息,将目标细胞分取到排列有具有开口的孔的容器中;摄像工序,拍摄分取到容器中的细胞;以及确定工序,基于通过摄像工序拍摄到的细胞的图像获取来自细胞的第2信息,并从已分取的细胞中确定要分析的细胞。

优选在分取工序之前还具有对细胞进行染色的工序。

优选容器中排列有具有开口的多个孔。

优选在摄像工序中,包括通过离心分离使细胞向孔的底面移动的步骤。

优选在摄像工序中,包括针对分取到容器中的细胞,从与容器的孔的开口相反的一侧拍摄细胞的步骤。

优选在分取工序中,包括将孔的位置与第1信息建立关联的步骤,并且在确定工序中,包括将第2信息与已建立关联的孔的位置和第1信息建立关联的步骤。

优选第1信息包含前方散射光、侧方散射光和荧光中的至少一个,第2信息包含荧光、细胞的形状、透射色和大小中的至少一个。

优选试样液体含有血细胞。

优选容器中,孔配置成行和列。

优选在确定工序之后具有从容器中仅取出要分析的细胞的取出工序。

优选在取出工序中,使用毛细管或移液管仅取出要分析的细胞。

优选将在取出工序中取出的细胞移动到PCR用管或PCR用板。

优选将第1信息和第2信息与PCR用管或PCR用板的位置信息建立关联。

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