[发明专利]淀粉样蛋白球体（ASPD）样结构体及医药组合物

说明书

本发明提供细胞分泌型淀粉样蛋白球体样结构体及使用了该结构体的医药及疫苗以及它们的制法。本发明在一个实施方式中涉及一种制造方法，其包含下述工序：在培养液中对表达淀粉样蛋白前体蛋白(APP)或包含淀粉样蛋白β蛋白(Aβ)序列的APP的一部分的细胞进行培养，在该培养液中得到细胞分泌型淀粉样蛋白球体(ASPD)样结构体。

技术领域

本发明涉及淀粉样蛋白球体(ASPD)样结构体、其制造方法及其用途、医药组合物、其制造方法及其用途以及筛选方法。

背景技术

淀粉样蛋白球体(amylospheroids(ASPD))是约30个淀粉样蛋白β蛋白(Aβ)聚集而成的直径为约10nm的球状的Aβ集合体，其被认为是在阿尔兹海默病发病的不可逆阶段发挥重要作用的结构体。

ASPD作为显示强神经毒性的体外合成的Aβ集合体(即合成ASPD)而被分离(非专利文献1)。已制作了针对该合成ASPD的特异性抗体(专利文献1及2)，并使用该抗体从阿尔兹海默病的人患者的脑中实际分离到在生物体内形成的ASPD(即天然ASPD)(非专利文献1)。

天然ASPD以及合成ASPD同样地选择性地诱导成熟神经细胞发生细胞死亡。发现该神经细胞死亡中的ASPD的靶是对神经的生存和功能发挥极为重要的作用的突触蛋白“Na⁺,K⁺-ATPase泵的α3亚单位(以下称为NAKα3)”，并清楚了通过ASPD的结合，NAKα3的功能降低，神经细胞过度兴奋，由此导致神经细胞死亡(专利文献3、非专利文献2)。

与阿尔兹海默病的临床症状最为相关的是神经细胞的脱落。清楚了可见神经细胞脱落的阿尔兹海默病患者的大脑皮层中的天然ASPD量与阿尔兹海默病的重症度相关地增加，而未明确可见神经细胞脱落的阿尔兹海默病患者的小脑中的天然ASPD量仅微量存在(非专利文献3)。因此认为淀粉样蛋白球体在阿尔兹海默病发病的不可逆阶段发挥重要的作用。此外，从路易体痴呆症患者的脑中也检测到天然ASPD(非专利文献3)，认为对于路易体痴呆症，天然ASPD也在其发病中发挥重要的作用。

被认为与天然ASPD等价的合成ASPD可通过缓慢搅拌含有Aβ的液体来制造(非专利文献1、专利文献4)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2006/016644

专利文献2：WO2009/057664

专利文献3：WO2013/099806

专利文献4：WO2013/094614

非专利文献

非专利文献1：Hoshi et al.,Spherical aggregates ofβ-amyloid(amylospheroid)show high neurotoxicity and activate tau protein kinase I/glycogen synthase kinase-3β,PNAS May 27,2003vol.100no.11 6370-6375

非专利文献2：Ohinishi et al.,Na,K-ATPaseα3is a death target ofAlzheimer patient amyloid-βassembly,PNAS August 11,2015vol.112no.32E4465-E4474

非专利文献3：Noguchi et al.,Isolation and characterization of patient-derived,toxic,high mass amyloid beta-protein(Abeta)assembly from Alzheimerdisease brains,J Biol Chem.2009Nov 20；284(47)：32895-905