[发明专利]改造丝心蛋白在审
申请号: | 201780025795.3 | 申请日: | 2017-04-28 |
公开(公告)号: | CN109311954A | 公开(公告)日: | 2019-02-05 |
发明(设计)人: | 森田启介;菅原润一 | 申请(专利权)人: | 丝芭博株式会社;小岛冲压工业株式会社 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/09;D01F4/02 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 鲁雯雯;金龙河 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氨基酸序列 丝心蛋白 基序 氨基酸残基 甘氨酸残基 结构域序列 残基数 改造 含量降低 天然来源 总氨基酸 丙氨酸 置换 | ||
1.一种改造丝心蛋白,其为包含式1:[(A)n基序-REP]m所表示的结构域序列的改造丝心蛋白,其中,
所述结构域序列具有与天然来源的丝心蛋白相比相当于至少REP中的一个或两个以上甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的、甘氨酸残基的含量降低的氨基酸序列,
式1中,(A)n基序表示由4~20个氨基酸残基构成的氨基酸序列,并且(A)n基序中丙氨酸残基数相对于总氨基酸残基数为83%以上,REP表示由10~200个氨基酸残基构成的氨基酸序列,m表示8~300的整数,两个以上存在的(A)n基序彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列,两个以上存在的REP彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的改造丝心蛋白,其中,所述结构域序列具有与天然来源的丝心蛋白相比相当于在REP中的选自GGX和GPGXX中的至少一种基序序列中至少一个或两个以上该基序序列中的一个甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的氨基酸序列,其中,X表示甘氨酸以外的氨基酸残基。
3.如权利要求2所述的改造丝心蛋白,其中,甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的基序序列相对于全部基序序列的比例为10%以上。
4.一种改造丝心蛋白,其为包含式1:[(A)n基序-REP]m所表示的结构域序列的改造丝心蛋白,其中,
将从所述结构域序列中除去位于最靠C末端侧的(A)n基序至所述结构域序列的C末端为止的序列而得到的序列中的全部REP中含有的由XGX构成的氨基酸序列的总氨基酸残基数设为z、将从所述结构域序列中除去位于最靠C末端侧的(A)n基序至所述结构域序列的C末端为止的序列而得到的序列中的总氨基酸残基数设为w时,z/w为50.9%以上,其中,X表示甘氨酸以外的氨基酸残基,
式1中,(A)n基序表示由4~20个氨基酸残基构成的氨基酸序列,并且(A)n基序中丙氨酸残基数相对于总氨基酸残基数为83%以上,REP表示由10~200个氨基酸残基构成的氨基酸序列,m表示8~300的整数,两个以上存在的(A)n基序彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列,两个以上存在的REP彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列。
5.如权利要求1~4中任一项所述的改造丝心蛋白,其中,具有与天然来源的丝心蛋白相比在相当于REP中的一个或两个以上甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的基础上、相当于进一步置换、缺失、插入和/或添加有一个或两个以上氨基酸残基的氨基酸序列。
6.如权利要求5所述的改造丝心蛋白,其中,所述天然来源的丝心蛋白为昆虫或蜘蛛类来源的丝心蛋白。
7.如权利要求5所述的改造丝心蛋白,其中,所述天然来源的丝心蛋白为蜘蛛类的大壶状腺丝蛋白(MaSp)或小壶状腺丝蛋白(MiSp)。
8.如权利要求5~7中任一项所述的改造丝心蛋白,其中,所述结构域序列具有与所述天然来源的丝心蛋白相比相当于在REP中的选自GGX和GPGXX中的至少一种基序序列中至少一个或两个以上该基序序列中的一个甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的氨基酸序列,并且,甘氨酸残基被置换为其他氨基酸残基的基序序列相对于全部基序序列的比例为10%以上,其中,X表示甘氨酸以外的氨基酸残基。
9.如权利要求8所述的改造丝心蛋白,其中,所述其他氨基酸残基为选自由谷氨酰胺(Q)残基、缬氨酸(V)残基、亮氨酸(L)残基、异亮氨酸(I)残基、甲硫氨酸(M)残基、脯氨酸(P)残基、苯丙氨酸(F)残基、色氨酸(W)残基、天冬酰胺(N)残基、丝氨酸(S)残基、赖氨酸(K)残基和谷氨酸(E)残基组成的组中的氨基酸残基。
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