[发明专利]荧光探针、荧光检测方法及荧光探针的使用方法在审
申请号: | 201780026210.X | 申请日: | 2017-02-10 |
公开(公告)号: | CN109073556A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 林幸一朗;坂本涉;余语利信;丸冈弘规 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人名古屋大学;仓敷纺绩株式会社 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N15/14;G01N21/78;G01N33/48;G01N33/53;C12Q1/02 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 王灵菇 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 荧光色素 荧光探针 荧光 荧光标记细胞 目标细胞 荧光检测 载体分子 体内 荧光探针标记 流式细胞仪 荧光显微镜 成像装置 激发波长 体内荧光 荧光标记 激发光 分选 观察 照射 细胞 移植 | ||
1.一种荧光探针,其特征在于,在包含载体分子、和与所述载体分子结合的荧光色素a和荧光色素b的荧光探针中,荧光色素a的激发波长与荧光色素b的激发波长不同、并且在荧光色素a与荧光色素b之间不产生荧光共振能量移动。
2.根据权利要求1所述的荧光探针,其中,所述荧光探针为细胞标记用荧光探针,荧光色素a为体外荧光成像用荧光色素,荧光色素b为体内荧光成像用荧光色素。
3.根据权利要求1或2所述的荧光探针,其通过特异性结合于细胞表面来标记细胞。
4.根据权利要求1或2所述的荧光探针,其通过被摄入到细胞内部来标记细胞。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的荧光探针,其中,荧光色素a的激发波长为350~650nm的范围。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的荧光探针,其中,荧光色素b的激发波长为600~850nm的范围。
7.根据权利要求1~6中任一项所述的荧光探针,其中,荧光色素a为卟啉。
8.根据权利要求1~7中任一项所述的荧光探针,其中,荧光色素b为吲哚菁绿。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的荧光探针,其中,所述载体分子为聚硅氧烷。
10.根据权利要求2~9中任一项所述的荧光探针,其用于利用流式细胞仪进行的荧光标记细胞的分选。
11.一种检测目标细胞的荧光检测方法,其特征在于,其包含:
用荧光探针对目标细胞进行标记的工序,和
向用荧光探针标记的目标细胞照射激发光,观察来自荧光探针的荧光的工序,
其中,所述荧光探针包含载体分子、和与所述载体分子结合的荧光色素a及荧光色素b,荧光色素a的激发波长与荧光色素b的激发波长不同,并且在荧光色素a与荧光色素b之间不产生荧光共振能量移动。
12.根据权利要求11所述的荧光检测方法,其中,荧光色素a为体外荧光成像用荧光色素,荧光色素b为体内荧光成像用荧光色素。
13.根据权利要求11或12所述的荧光检测方法,其中,对用荧光探针标记的目标细胞照射激发荧光色素a的激发光,通过体外荧光成像观察来自荧光探针的荧光。
14.根据权利要求11或12所述的荧光检测方法,其中,将用荧光探针标记的目标细胞移植到生物体内,向该生物体照射激发荧光色素b的激发光,通过体内荧光成像观察来自荧光探针的荧光,所述生物体除外人体。
15.根据权利要求11~14中任一项所述的荧光检测方法,其中,所述荧光探针通过特异性结合于细胞表面来标记细胞。
16.根据权利要求11~14中任一项所述的荧光检测方法,其中,所述荧光探针通过被摄入到细胞内部来标记细胞。
17.根据权利要求11~16中任一项所述的荧光检测方法,其中,荧光色素a的激发波长为350~650nm的范围。
18.根据权利要求11~17中任一项所述的荧光检测方法,其中,荧光色素b的激发波长为600~850nm的范围。
19.根据权利要求11~18中任一项所述的荧光检测方法,其中,荧光色素a为卟啉。
20.根据权利要求11~19中任一项所述的荧光检测方法,其中,荧光色素b为吲哚菁绿。
21.权利要求1~10中任一项所述的荧光探针的使用方法,其特征在于,其包含:
用荧光探针对细胞进行荧光标记的工序,
利用流式细胞仪或荧光显微镜确认用荧光探针进行了荧光标记的荧光标记细胞并进行分选的工序,
将分选出的荧光标记细胞移植到生物体内的工序,所述生物体除外人体,和
利用体内荧光成像装置观察生物体内的荧光标记细胞的工序,
其中,所述利用流式细胞仪或荧光显微镜进行的荧光标记细胞的分选通过检测来自荧光色素a的荧光来进行,所述生物体内的荧光标记细胞利用体内荧光成像装置进行的观察通过检测来自荧光色素b的荧光来进行。
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