[发明专利]α-淀粉酶变体以及编码它们的多核苷酸有效

专利信息
申请号: 201780026494.2 申请日: 2017-05-03
公开(公告)号: CN109415421B 公开(公告)日: 2023-02-28
发明(设计)人: T.B.勒盖伊拉;B.普莱斯纳;T.H.布利切;A.D.霍格;S.阿恩赫德;L.L.H.克里斯滕森;C.安德森 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N9/28
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 张文辉;凃滔
地址: 丹麦*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 淀粉酶 变体 以及 编码 它们 多核苷酸
【说明书】:

发明涉及具有α‑淀粉酶活性的多肽。本发明还涉及编码这些多肽的多核苷酸;包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体、和宿主细胞;以及使用这些多肽的方法。

对序列表的引用

本申请包含计算机可读形式的序列表,将其通过引用结合在此。

背景技术

技术领域

本发明涉及α-淀粉酶变体(即,具有α-淀粉酶活性的多肽)、编码该α- 淀粉酶的核酸、生产该α-淀粉酶的方法、包含该α-淀粉酶的组合物以及使用 该α-淀粉酶的方法。

相关技术说明

α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶,E.C.3.2.1.1)由一组酶构成, 这些酶催化淀粉以及其他直链和支链1,4-糖苷寡糖和多糖的水解。

α-淀粉酶在工业上用于若干种已知应用的用途具有悠久历史,这些应用 如洗涤剂、烘焙、酿造、淀粉液化和糖化,例如在高果糖糖浆的制备中或用 作从淀粉生产乙醇的一部分。α-淀粉酶的这些应用和其他应用是已知的并且 利用了衍生自微生物的α-淀粉酶,特别是细菌α-淀粉酶。

芽孢杆菌α-淀粉酶例如特妙(Termamyl)AA560(SEQ ID NO:2;还参 见WO 2000/060060)和SP707(SEQ ID NO:8;还参见Tsukamoto等人,1988,Biochem.Biophys.Res.Comm.[生物化学和生物物理研究通讯]151:25-31)形 成特定的、已经用于洗涤剂中的α-淀粉酶的组。已经对这些淀粉酶进行修饰 以改进其在洗涤剂中的稳定性。例如,WO 96/23873披露了α-淀粉酶SP690、 SP722(SEQ ID NO:5)和SP707(SEQ IDNO:8)的缺失型突变体(还参 见WO 96/23873的SEQ ID NO:1、2和7)以改进这些淀粉酶的稳定性。 WO 96/23873进一步披露了取代型突变体,以针对氧化来稳定淀粉酶。具有 改进的特性的另外的α-淀粉酶突变体披露于WO 2006/002643和WO 01/66712中。

因而,修饰天然存在的淀粉酶来改进某些特性是已知的。

本发明的目的是提供具有α-淀粉酶活性的多肽(α-淀粉酶),该多肽具 有改进的洗涤性能,尤其是用于自动洗涤机和/或餐具洗涤机。

发明内容

本发明涉及对应于衍生自芽孢杆菌属的α-淀粉酶的变体具有α-淀粉酶 活性的多肽。具体而言,本发明的多肽包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列或 由其组成,其中这些氨基酸中的一个或多个发生突变(例如,通过取代或缺 失),使得该多肽展现增强的洗涤性能(尤其在自动洗涤机和/或餐具洗涤机 中)。

本发明还涉及编码变体α-淀粉酶多肽的多核苷酸;包含这些多核苷酸的 核酸构建体、载体、和宿主细胞;以及生产这些变体α-淀粉酶多肽的方法。

本发明还涉及包含这些变体α-淀粉酶多肽的洗涤剂组合物,以及这些洗 涤剂组合物在家庭和工业清洗过程(如衣物清洗和餐具洗涤)中的用途。

附图说明

图1示出了SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的比对

定义

α-淀粉酶:术语“α-淀粉酶”(α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶,E.C.3.2.1.1) 构成一组酶,这些酶催化淀粉以及其他直链和支链1,4-糖苷寡糖和多糖的水 解。出于本发明的目的,根据实例1中所述的程序测定α-淀粉酶活性。在一 方面,本发明的变体具有SEQ IDNO:1的成熟多肽的α-淀粉酶活性的至少 20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少 90%、至少95%、或至少100%。

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