[发明专利]细胞化支架的3D打印在审
申请号: | 201780027313.8 | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN109477071A | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 哈根·贝利;萨姆·奥诺夫;亚历山大·D·格雷厄姆;马德琳·伯克;詹姆斯·阿姆斯壮;亚当·佩里曼;詹姆斯·尼科尔森;弗朗西斯·塞莱 | 申请(专利权)人: | 牛津大学创新有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/00;C12M3/02;C12M1/26 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 何冲;黄隶凡 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 液滴 水性介质 水凝胶化合物 生物细胞 两亲分子 疏水介质 液滴接触 组件包括 接触液 细胞化 制备液 支架 打印 | ||
1.一种用于制造液滴组件的方法,所述液滴组件包括多个液滴,其中每个所述液滴包括:
水性介质,其包含水凝胶化合物;和
一个或多个生物细胞,其设置在所述水性介质中,
所述方法包括:
在本体疏水介质中产生多个液滴,其中每个所述液滴包括:
水性介质,其包含水凝胶化合物;和
一个或多个生物细胞,其设置在所述水性介质中。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述水凝胶化合物是多糖,优选地,其中所述水凝胶化合物是琼脂糖。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述水性介质还包含一种或多种稳定剂。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述一种或多种稳定剂选自含有二肽的化合物,优选地,其中所述一种或多种稳定剂选自用FMOC基团保护的二肽,更优选地,其中所述一种或多种稳定剂是FMOC-异亮氨酸-甘氨酸和/或FMOC-苯丙氨酸-苯丙氨酸。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述水性介质还包含细胞外膜蛋白,优选地,其中所述细胞外膜蛋白包括胶原蛋白、纤连蛋白或层粘连蛋白。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述水性介质还包含培养基,优选地,其中所述培养基是一种或多种氨基酸、一种或多种盐、葡萄糖和一种或多种维生素的水溶液。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述水性介质包含:
(a)浓度为0.5至30.0mg/mL的水凝胶;
(b)浓度为60.0至90.0体积%的培养基;和
(c)浓度为0.1至10.0mmol/L的含有二肽的化合物;并且非必要地,
(d)浓度为0.001至1.0mg/mL的细胞外膜蛋白。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述一个或多个生物细胞选自两种或更多种不同类型的生物细胞。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,
(a)一个或多个所述液滴中的每一个均包含设置在所述水性介质中的两个或更多个生物细胞,并且其中所述两个或更多个生物细胞选自两种或更多种不同类型的生物细胞,或者
(b)所述液滴组件包括
第一多个液滴,每个所述第一多个液滴包含一个或多个设置在所述水性介质中的第一类型的生物细胞,和
第二多个液滴,每个所述第二多个液滴包含一个或多个设置在所述水性介质中的第二类型的生物细胞。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述一个或多个生物细胞是哺乳动物细胞。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述一个或多个生物细胞以每毫升水性介质中105至109个细胞的浓度设置在所述水性介质中。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述本体疏水介质包含碳氢化合物和/或硅油,优选地,其中所述碳氢化合物是C8至C16烷烃,更优选地,其中碳氢化合物是十一烷。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述本体疏水介质包含碳氢化合物和硅油的混合物,所述碳氢化合物和硅油的比例(碳氢化合物):(硅油)按体积计为50:50至80:20,优选地,比例按体积计为60:40到70:30。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,所述本体疏水介质还包含一种或多种两亲化合物。
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