[发明专利]肝细胞癌的诊断测试

权利要求书

1.用于检测样品中岩藻糖基化α1-酸性糖蛋白(AGP)的方法，其包括以下步骤：

-提供固定于固相的与具有根据SEQ ID NO：1的氨基酸的肽具有至少80％同一性例如85％、90％、95％、99％或100％同一性的单价岩藻糖结合肽；

-使所述样品与所述固定的岩藻糖结合肽接触；以及

-检测与所述岩藻糖结合肽结合的任何岩藻糖基化AGP。

2.根据权利要求1所述的方法，其还包括量化所述样品中AGP的量。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中对任何结合的岩藻糖基化AGP的检测通过使任何结合的岩藻糖基化AGP与第一检测抗体接触来进行，所述第一检测抗体能够特异性结合与所述岩藻糖结合肽结合的岩藻糖基化AGP。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述第一检测抗体对包含人AGP的第183至201位氨基酸残基(SEQ ID NO：3)的表位具有特异性。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其中所述第一检测抗体与可检测标记物缀合。

6.根据权利要求3或4所述的方法，其中对与所述岩藻糖结合肽结合的任何岩藻糖基化AGP的检测通过使任何结合的岩藻糖基化AGP与能够特异性结合与所述岩藻糖结合肽结合的岩藻糖基化AGP的第一检测抗体和能够与所述第一检测抗体特异性结合的第二检测抗体接触来进行，并且其中所述第二检测抗体与可检测标记物缀合。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述可检测标记物选自酶和荧光团，所述酶包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和葡糖氧化酶。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的方法，其中所述第一检测抗体是多克隆抗体或单克隆抗体。

9.根据权利要求6至7中任一项所述的方法，其中所述第二检测抗体是多克隆抗体或单克隆抗体。

10.根据权利要求8至9中任一项所述的方法，其中所述第一检测抗体是根据权利要求25至30中任一项所述的抗体，或者是通过根据权利要求24所述的方法产生的。

11.根据权利要求1或2所述的方法，其中对任何结合的岩藻糖基化AGP的检测包括从所述固相释放所述岩藻糖结合肽，从所述固相分离肽：AGP复合体，以及在所分离的级分中检测AGP。

12.根据权利要求11所述的方法，其中对所分离级分中AGP的检测包括SDS-PAGE或Western印迹。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述AGP具有指示肝细胞癌的糖基化模式。

14.用于评估人个体患有肝细胞癌(HCC)的风险的方法，其包括以下步骤：使用根据权利要求1至13中任一项所述的方法检测来自所述个体的样品中的岩藻糖基化AGP，其中与来自未患有HCC的人个体的参考浓度相比岩藻糖基化AGP浓度提高指示所述个体患有HCC的风险提高。

15.根据权利要求14所述的方法，其还包括测量总AGP浓度和总甲胎蛋白(AFP)浓度中的至少一种。

16.根据权利要求14所述的方法，其还包括测量总AGP浓度和总甲胎蛋白(AFP)浓度。

17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中与来自患有肝硬化和/或肝炎但未患HCC的人个体的参考浓度相比岩藻糖基化AGP浓度提高指示所述个体患有HCC的风险提高。