[发明专利]经修饰的HIV-1用于产生完全人抗体的用途

权利要求书

1.产生抗体或其抗体片段的方法，其包括以下步骤：

a)向包含异源免疫细胞的哺乳动物施用包含SEQ ID NO：15所示核苷酸序列的病毒或病毒样颗粒；以及

b)从所述哺乳动物中分离哺乳动物免疫球蛋白生成细胞群，从而产生所述抗体或其抗体片段。

2.根据权利要求1所述的方法，其还包括以下步骤：

c)将所述细胞群的VH和VL mRNA逆转录成VH和VL cDNA序列的混合群；

d)将DNA片段的所述混合群克隆到表达载体中；以及

e)表达克隆的DNA片段，从而产生所述抗体或其片段。

3.根据权利要求1所述的方法，其还包括以下步骤：

c)将所述免疫球蛋白生成细胞与骨髓瘤细胞融合以形成亲本杂交瘤细胞；以及

d)培养所述杂交瘤细胞，从而产生所述抗体或其抗体片段。

4.根据权利要求1所述的方法，其还包括以下步骤：

c)将所述免疫球蛋白生成细胞与骨髓瘤细胞融合以形成亲本杂交瘤细胞群；

d)培养所述杂交瘤细胞群；

e)将所述细胞群的VH和VL mRNA逆转录成VH和VL cDNA序列的混合群；

f)将DNA片段的所述混合群克隆到表达载体中并扩增所克隆的表达载体；

h)选择表达载体亚群，其编码针对病毒或病毒样颗粒编码之蛋白质的抗体或抗体片段；以及

i)并扩增所选择的亚群，从而产生所述抗体或其抗体片段。

5.根据权利要求1至4中所述的任一项方法，其中所述异源免疫细胞是人免疫细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述哺乳动物是非人哺乳动物。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述哺乳动物是啮齿动物。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述啮齿动物是小鼠。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述小鼠是转基因小鼠。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述转基因小鼠缺乏成熟的淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述转基因小鼠是NOD-scid IL2Rγ^null小鼠品系。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述转基因小鼠包含移植的人组织，所述组织包含选自人胎儿胸腺组织、人胎儿肝脏组织和人CD34⁺胎儿肝脏细胞的一种或更多种组织。

13.根据权利要求12所述的方法，所述人胎儿胸腺组织和/或人胎儿肝脏组织被移植在所述小鼠肾小囊下。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述人CD34⁺胎儿肝脏细胞被全身移植。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述抗体或其抗体片段是人抗体。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述人抗体是抗HIV-1抗体。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述人抗体是抗HIV-1中和抗体。

18.根据权利要求14所述的方法，其中所述病毒或病毒样颗粒还包含编码异源蛋白质的核苷酸序列。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述异源蛋白质是螺旋体伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)的外表面蛋白A(OspA)。